Anticorpo Monoclonal Anti-Humano CD162/PSGL-1 de Coelho APC para Citometria de Fluxo - Q14242

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ligante glicoprotéico de P-selectina 1 (CD162/PSGL-1)

• O CD162/PSGL-1 é um proteoglicano do tipo SLe(x) que atua como o principal ligante das P-, E- e L-selectinas, mediando o rolamento rápido de leucócitos no endotélio vascular durante a inflamação.
• A proteína existe em múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo, o que pode modular suas propriedades de ligação ou expressão.
• É expresso predominantemente na superfície de neutrófilos, monócitos e maioria dos linfócitos, desempenhando um papel crítico no tráfego de leucócitos.
• A localização subcelular é principalmente na membrana plasmática (Membrana; Proteína de membrana tipo I de passagem única).
• O PSGL-1 é intensamente modificado pós-tradução, incluindo sulfatação, sialilação e O-glicosilação, que são essenciais para a ligação à selectina; modificações adicionais incluem fosforilação, formação de ligações dissulfeto e formação de piroglutamato N-terminal.
• Além do seu papel na adesão celular, o PSGL-1 atua como receptor do enterovírus 71, facilitando a entrada viral nas células hospedeiras.
• A proteína contém um peptídeo sinal, um domínio extracelular do tipo mucina com repetições decaméricas, uma hélice transmembranar e uma cauda citoplasmática.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aa 42-295), espera-se que o anticorpo resultante reconheça a forma transmembrana nativa do CD162/PSGL-1 em células vivas, tornando-o particularmente adequado para citometria de fluxo (FC).
• Para aplicações de FC, otimize a titulação do anticorpo e considere o uso de controles de isotipo adequados para garantir a especificidade, especialmente devido ao potencial de ligação ao receptor Fc em leucócitos.
• Valide a expressão do CD162 nas populações de células alvo (por exemplo, leucócitos do sangue periférico, células T ativadas ou linhas celulares apropriadas) antes do uso, pois os níveis de expressão podem variar com o estado de ativação celular.
• Como o PSGL-1 é uma proteína intensamente glicosilada, o epítopo reconhecido pode ser dependente da conformação; condições desnaturantes podem afetar a ligação do anticorpo em aplicações alternativas como o western blotting.
• O conjugado APC permite detecção direta por fluorescência, eliminando a necessidade de reagentes secundários; garanta a compensação adequada em painéis de citometria de fluxo multicolor para evitar sobreposição espectral.

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