Anticorpo Monoclonal de Coelho APC Anti-Humano CD172a/SIRPα para Citometria de Fluxo - P78324

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de SIRPα/CD172a

• A tirosina-proteína fosfatase substrato 1 não receptor (SIRPα, também conhecida como SHPS-1, CD172a, BIT, MYD-1, p84) é um receptor de superfície celular do tipo imunoglobulina que atua como uma proteína de ancoragem para PTPN6 e PTPN11, induzindo sua translocação do citosol para a membrana plasmática.
• Funciona como um receptor para CD47, mediando a regulação negativa da fagocitose, ativação de mastócitos e ativação de células dendríticas, e inibindo a maturação e a produção de citocinas por células dendríticas após a ligação a CD47.
• Suporta a adesão de neurônios cerebelares, o crescimento de neuritos e a fixação de células gliais, sugerindo papéis na sinaptogênese e função sináptica.
• Atua como um receptor para trombospondina-1 (THBS1), que estimula a fosforilação de SIRPA e desencadeia a produção de ROS derivada da NADPH oxidase em células não fagocíticas. Referências relacionadas: PMID:24511121
• Existe como três isoformas principais (Sirp-alfa-1, -2, -3) devido ao splicing alternativo, com expressão tecidual ubíqua, mas níveis mais altos no cérebro e em células mieloides, e ausente em células T.
• Localiza-se na membrana celular como uma proteína transmembranar tipo I de passagem única, com uma região extracelular contendo três domínios do tipo imunoglobulina e uma cauda citoplasmática com sítios de fosforilação de tirosina.
• É altamente glicosilada e fosforilada, desempenhando um papel na imunidade antiviral ao limitar a internalização de arenavírus do Novo Mundo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 31–370, que compreendem todo o domínio extracelular; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça a conformação nativa do SIRPα na superfície celular.
• Sendo um anticorpo monoclonal conjugado a APC, está pronto para coloração direta por imunofluorescência em citometria de fluxo, sem a necessidade de um reagente de detecção secundário.
• Para uma coloração ideal, faça a titulação do anticorpo no tipo celular alvo (por exemplo, monócitos humanos, macrófagos ou linhagens de células dendríticas) para determinar a concentração de trabalho.
• Inclua um controle de isotipo apropriado (IgG de coelho conjugado a APC, clone correspondente) e, se estiver usando sangue total ou suspensões celulares derivadas de tecido, pré-incube com um reagente de bloqueio de receptor Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Como o SIRPα não é expresso em células T, elas podem servir como um controle negativo interno; valide a especificidade sob suas condições experimentais usando populações celulares positivas e negativas conhecidas.

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