Anticorpo monoclonal de coelho anti-CD275/B7-H2/ICOSL humano conjugado a APC para FC - O75144

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do ligante de ICOS

• ICOSLG codifica o ligante de ICOS (também conhecido como B7-H2, B7RP-1, CD275, GL50), um membro da família B7 de proteínas reguladoras do sistema imunológico. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• Funciona como ligante do receptor específico de células T ICOS, fornecendo sinais coestimuladores que promovem a proliferação de células T e a secreção de citocinas. Referências relacionadas: PMID:11007762 PMID:11023515 PMID:30498080
• Induz a proliferação de células B e sua diferenciação em plasmócitos, contribuindo para a imunidade humoral.
• Em células endoteliais, o ligante de ICOS é essencial para a transmigração adequada de neutrófilos em resposta a quimioatraentes como CXCL8/IL-8 e fMLP. Referências relacionadas: PMID:30498080
• Localização subcelular: membrana celular, consistente com seu papel como ligante transmembranar de receptor.
• Modificações pós-traducionais: glicoproteína com pontes dissulfeto, característica de proteínas contendo domínios de imunoglobulina.
• Distribuição tecidual: amplamente expressa no nível de mRNA; no nível proteico, detectada em células B do sangue periférico, monócitos, células dendríticas derivadas de monócitos e em linfonodos, leucócitos e baço.
• Palavras-chave: imunidade adaptativa, ativação de células B, domínio de imunoglobulina, hélice transmembranar, entre outras.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para citometria de fluxo, utilize este anticorpo conjugado a APC para a coloração por imunofluorescência direta de células humanas vivas, preservando a conformação do ligante de ICOS na superfície celular.
• Valide a reatividade do anticorpo no seu sistema experimental específico; os níveis de expressão podem variar de acordo com o tipo celular e o estado de ativação.
• Como o imunógeno abrange o domínio extracelular (aa 19-256), é provável que o anticorpo reconheça a conformação nativa do CD275 expresso na superfície celular.
• Realize a titulação ideal do anticorpo (por exemplo, 0,1–5 µg/mL) para obter a melhor relação sinal-ruído e inclua controles de isotipo apropriados.
• Evite etapas de fixação ou permeabilização que possam desnaturar o epítopo extracelular; se a fixação for necessária, teste previamente a compatibilidade.
• Para análises qualitativas, considere um protocolo de coloração indireta em duas etapas caso a conjugação direta resulte em sinal insuficiente.
• Não foi relatada reatividade cruzada com espécies não humanas; com base nos dados de validação atuais, utilize apenas com amostras humanas.

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