Anticorpo Monoclonal Anti-EGFR Humano de Coelho em APC para Citometria de Fluxo - P00533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do EGFR

• O receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR) é um receptor tirosina quinase prototípico que, após se ligar a ligandos da família EGF, sofre homo ou heterodimerização e autofosforilação, ativando cascatas de sinalização descendentes chave, incluindo RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e STATs (PubMed:27153536, PubMed:2790960). Referências relacionadas: PMID:27153536, PMID:2790960
• Os ligandos conhecidos do EGFR incluem EGF, TGF-α, anficregulina (AREG), epigen (EPGN), betacelulina (BTC), epiregulina (EREG) e o fator de crescimento semelhante a EGF ligante de heparina (HBEGF), cada um desencadeando dinâmicas de sinalização distintas (PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029). Referências relacionadas: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• O EGFR fosforilado recruta proteínas adaptadoras como GRB2, iniciando uma sinalização intracelular complexa que regula a proliferação, sobrevivência, migração e diferenciação celular (PubMed:10805725). Referências relacionadas: PMID:10805725
• Além das vias canônicas, o EGFR fosforila diretamente substratos como RGS16 (acoplamento à sinalização de proteínas G) (PubMed:11602604) e MUC1 (promovendo interações SRC/β-catenina) (PubMed:11483589). Referências relacionadas: PMID:11602604, PMID:11483589
• O EGFR modula a motilidade celular por meio da interação com CCDC88A/GIV, que retém o receptor na membrana plasmática para sustentar a sinalização pró-migratória (PubMed:20462955). Referências relacionadas: PMID:20462955
• Também pode ativar a cascata de NF-κB (PubMed:11116146) e contribuir para processos neurológicos como aprendizagem, memória e hipersensibilidade à dor (Por similaridade). Referências relacionadas: PMID:11116146
• A isoforma 2 atua como um antagonista potencial da ação do EGF e é notavelmente expressa em cânceres de ovário.
• A localização subcelular abrange a membrana plasmática, retículo endoplasmático, Golgi, endossomos e núcleo; o receptor também pode ser secretado. As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, fosforilação, ubiquitinação e palmitoilação.
• O EGFR atua como receptor celular do hospedeiro para a entrada do vírus da hepatite C (HCV) em hepatócitos, facilitando a formação do complexo CD81-CLDN1.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 335–525 do domínio extracelular do EGFR humano, tornando este anticorpo conjugado com APC adequado para a detecção de EGFR de superfície por citometria de fluxo direta.
• Como o EGFR é expresso de forma ubíqua, inclua controles de isotipo adequados e considere utilizar uma linha celular conhecida por expressar EGFR positivamente (ex: A431 ou HeLa) para a configuração inicial do ensaio.
• Para um sinal ótimo, realize a titulação do anticorpo para determinar a melhor concentração de coloração e valide sob as suas condições experimentais específicas.
• No caso de co-coloração com outros fluoróforos, verifique a compatibilidade espectral e realize controles de compensação.

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