Anticorpo monoclonal de coelho anti-IgG humana (Fc) conjugado com APC para citometria de fluxo - P01857

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da região constante da IgG1 humana

• A cadeia gama 1 constante pesada da imunoglobulina (IGHG1) é a região constante da cadeia pesada gama 1, definindo o isotipo IgG1. Ela é expressa tanto como receptor ligado à membrana nas células B quanto como anticorpo secretado no plasma.
• A IgG1 ligada à membrana atua como receptor de antígeno das células B, desencadeando a expansão clonal e a diferenciação após a ligação ao antígeno. Os anticorpos IgG1 secretados medeiam a fase efetora da imunidade humoral por meio de sua região constante (Fc).
• A região de ligação ao antígeno é formada pelo domínio variável da cadeia pesada associado à cadeia leve. Uma afinidade antigênica notável é alcançada por meio do rearranjo V-(D)-J, da hipermutação somática e da maturação da afinidade.
• A região constante da IgG1 interage, por meio de sua porção Fc, com receptores Fc nas células imunes inatas e com o sistema do complemento. Essa interação medeia a citotoxicidade celular dependente de anticorpos (ADCC), a citotoxicidade dependente do complemento (CDC) e as respostas inflamatórias, levando à neutralização de patógenos. Referências relacionadas: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Subcelularmente, a IgG1 é encontrada secretada e ancorada à membrana celular dos linfócitos B. A forma ligada à membrana contém uma hélice transmembrana.
• As principais características incluem ligações dissulfeto que estabilizam a estrutura da imunoglobulina, sítios de glicosilação importantes para as funções efetoras e a capacidade de realizar splicing alternativo. A geração de IgG1 envolve recombinação de troca de classe a partir de IgM/IgD, diversificando o repertório de anticorpos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um fragmento recombinante da região Fc; portanto, o anticorpo reage com a região constante das cadeias pesadas da IgG1 humana. Espera-se que reconheça tanto as formas ligadas à membrana quanto as formas secretadas.
• Este conjugado é validado para citometria de fluxo. Para obter resultados ideais, titule o anticorpo na população celular-alvo para determinar a concentração de saturação e minimizar o background. Inclua controles de isotipo apropriados.
• Como reagente conjugado com APC, proteja o anticorpo da exposição prolongada à luz e evite vários ciclos de congelamento e descongelamento. Armazene de acordo com as instruções do fabricante.
• Na citometria de fluxo, considere o uso de um corante de viabilidade para excluir células mortas, pois elas podem ligar anticorpos de forma inespecífica. Confirme a especificidade corando células com perfis conhecidos de expressão de IgG.

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