Anticorpo monoclonal de coelho anti-IL-17A humano conjugado com APC para citometria de fluxo (intracelular) - Q16552

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da IL-17A

• A interleucina-17A (IL-17A), também conhecida como CTLA-8, é uma glicoproteína secretada pertencente à família de citocinas IL-17, com peso molecular de aproximadamente 17,5 kDa (UniProt: Q16552).
• A IL-17A atua como uma citocina efetora essencial da imunidade inata e adaptativa, estando criticamente envolvida na defesa antimicrobiana do hospedeiro e na manutenção da integridade dos tecidos. Referências relacionadas: PMID:24120361
• Ela medeia seus efeitos por meio do complexo receptor heterodimérico IL17RA-IL17RC, levando à ativação dependente de TRAF6 das vias NF-kB e das MAP quinases, bem como à indução transcricional ampla de mediadores pró-inflamatórios. Referências relacionadas: PMID:17911633 PMID:18684971 PMID:19825828
• Como citocina característica das células Th17, a IL-17A conecta a imunidade adaptativa e inata, promovendo principalmente o recrutamento e a ativação de neutrófilos nos locais de infecção e inflamação (por similaridade).
• Nas superfícies mucosas, a IL-17A induz peptídeos antimicrobianos, como beta-defensinas, e quimiocinas, limitando assim a entrada de microrganismos através das barreiras epiteliais (por similaridade).
• Após uma lesão epitelial aguda, a IL-17A promove diretamente o reparo da barreira ao regular proteínas das junções estreitas, incluindo OCLN. Referências relacionadas: PMID:21350122
• A IL-17A também está envolvida na homeostase das células B, na formação de centros germinativos e nas respostas imunes antivirais contra o vírus do Nilo Ocidental e o vírus da influenza (por similaridade).
• No nível proteico, a IL-17A é expressa em células Th17 de memória e secretada no espaço extracelular, onde exerce seus efeitos parácrinos e sistêmicos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo foi produzido utilizando um imunógeno que abrange os aminoácidos 24-155 da IL-17A humana (proteína madura). Espera-se que reconheça a forma nativa secretada.
• Para citometria de fluxo intracelular (FC intra), certifique-se de realizar adequadamente as etapas de fixação e permeabilização para permitir o acesso do anticorpo à IL-17A citoplasmática. Considere utilizar protocolos padrão com fixação em paraformaldeído e permeabilização com saponina ou metanol.
• Como conjugado com APC, proteja o anticorpo da exposição prolongada à luz para evitar o fotobranqueamento. Recomenda-se realizar experimentos de titulação para determinar a concentração ideal para suas amostras.
• O peso proteico relatado é de 18 kDa; no entanto, a glicosilação pode resultar em bandas com peso molecular ligeiramente superior. Valide a especificidade no seu sistema utilizando controles apropriados (por exemplo, células T estimuladas versus não estimuladas).
• Este anticorpo foi validado para reatividade humana; a reatividade cruzada com outras espécies não foi testada. Se for aplicado a amostras não humanas, verifique experimentalmente a reatividade cruzada.

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