Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Humano/Macaco IgM Conjugado com APC para Citometria de Fluxo - P01871

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Constante Pesada de Imunoglobulina Mu

• O gene IGHM codifica a região constante da cadeia pesada mu, que define o isotipo de anticorpo IgM. A IgM é o primeiro anticorpo produzido durante a imunidade humoral, servindo tanto como recetor de células B ligado à membrana (BCR) como uma molécula efetora secretada. Referências relacionadas: PMID:20176268 PMID:22158414 PMID:17576170
• A IgM secretada (sIgM) multimeriza predominantemente em pentâmeros através da região Fc, proporcionando ligação de antigénio de alta avidez e permitindo o reconhecimento de estruturas conservadas próprias e derivadas de patogénios. Referências relacionadas: PMID:32029689 PMID:37095205
• A sIgM media funções efetoras através da ativação da via clássica do complemento por ligação ao C1q e envolvendo recetores Fc, o que promove a fagocitose de células apoptóticas e a indução de respostas de IgG neutralizantes. Referências relacionadas: PMID:12847249 PMID:19006321 PMID:28230186
• A IgM ligada à membrana forma o complexo BCR, fornecendo sinalização tónica constitutiva essencial para a sobrevivência das células B e mediando a sinalização pré-BCR que regula a seleção de células B e a exclusão alélica.
• A IgM desempenha um papel crítico na imunidade mucosa ao sofrer transcitose através do epitélio mucoso via PIGR. Os complexos IgM–antigénio são retrotranscitados pelo FCMR através das células M para apresentação de antigénios. Referências relacionadas: PMID:32029689
• A localização subcelular é principalmente na membrana celular (como BCR) ou secretada (como anticorpo solúvel). As modificações pós-traducionais incluem N-glicosilação e formação de ligações dissulfeto intra e intercadeias.
• O splicing alternativo gera isoformas ligadas à membrana e secretas, permitindo que o mesmo gene da cadeia pesada produza tanto a forma de recetor como a de anticorpo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange a região constante da IgM (aa 218‑453), pelo que se espera que o anticorpo reconheça a IgM humana total, independentemente da especificidade do antigénio. Confirme a deteção de IgM solúvel e ligada à membrana no seu sistema.
• Este anticorpo conjugado com APC é adequado para citometria de fluxo direta sem uma etapa de deteção secundária. Inclua controlos de isotipo apropriados e reagentes de bloqueio de Fc para minimizar o fundo.
• A reatividade cruzada com a IgM de macaco Cynomolgus é indicada; verifique o desempenho se utilizar outras espécies de primatas.
• Dado que o peso da proteína da cadeia pesada da IgM secretada é de aproximadamente 49 kDa, considere o "gating" baseado no tamanho ou confirmação por western blot em condições redutoras se a validação do ensaio o exigir.
• Para a coloração intracelular de IgM, otimize as condições de fixação e permeabilização para o seu tipo de célula específico.

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