Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Humano/Rato PDGFRα/CD140a Conjugado com APC para FC - P16234

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PDGFRα

• O recetor alfa do fator de crescimento derivado das plaquetas (PDGFRα) é um recetor de tirosina quinase de superfície celular que se liga ao PDGFA, PDGFB e PDGFC, iniciando cascatas de sinalização que regulam a proliferação celular, sobrevivência, quimiotaxia e diferenciação. (UniProt: P16234)
• O recetor desempenha funções essenciais no desenvolvimento embrionário, incluindo a formação do esqueleto, fechamento cefálico, desenvolvimento da mucosa gastrointestinal e formação das vilosidades intestinais, e é necessário para a diferenciação de células estaminais mesenquimais derivadas da medula óssea.
• O PDGFRα é codificado pelo gene PDGFRA e também é conhecido como CD140a, PDGFR2 e PDGFR-2; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas e a proteína contém domínios semelhantes a imunoglobulinas na sua região extracelular.
• A ativação induzida por ligando leva à fosforilação de efetores a jusante como PIK3R1, PLCG1 e PTPN11, e promove a sinalização através das vias AKT1, MAPK/ERK e STAT, modulando diversas respostas celulares.
• A nível subcelular, o PDGFRα localiza-se na membrana celular, bem como no aparelho de Golgi e no cílio primário, refletindo o seu tráfego dinâmico e funções de sinalização.
• O recetor é amplamente expresso, com deteção em plaquetas, cérebro, fibroblastos, músculo liso, coração e embrião, e também é encontrado em tumores colorretais primários e metastáticos e em tecido colónico normal.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, fosforilação e ubiquitinação; a proteína é classificada como um proto-oncogene e está ligada a várias variantes de doença.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 24-524), tornando este anticorpo adequado para detetar o PDGFRα de superfície em células não fixadas ou fixadas e não permeabilizadas por citometria de fluxo.
• Para citometria de fluxo, titule o conjugado APC para determinar a concentração ótima de coloração e use controlos de isotipo apropriados e bloqueio de recetores Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Dado que este anticorpo apresenta reatividade cruzada com o PDGFRα de rato, valide o padrão de coloração em linhas celulares de rato ou células primárias para confirmar a especificidade no sistema modelo pretendido.
• O APC é um fluorocromo brilhante; certifique-se da configuração correta do laser e filtros (por exemplo, excitação de 633-635 nm, emissão de 660/20) e inclua corantes de viabilidade para excluir células mortas que podem ligar-se ao anticorpo de forma inespecífica.

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