Anticorpo Monoclonal Anti-CD32 de Rato APC de Coelho para Citometria de Fluxo (FC) - P08101

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD32

• O receptor II da região Fc da imunoglobulina gama de baixa afinidade (FcγRIIB), também conhecido como CD32, é codificado pelo gene Fcgr2b em ratos. O splicing alternativo produz múltiplas isoformas com propriedades funcionais distintas.
• Liga-se à região Fc de imunoglobulinas gama complexadas com baixa afinidade, mediando funções efetoras e reguladoras como a fagocitose de complexos antígeno-anticorpo e a modulação da produção de anticorpos por linfócitos B.
• As isoformas IIB1 e IIB1' formam cápsulas, mas não conseguem mediar endocitose ou fagocitose, enquanto a isoforma IIB2 pode mediar a endocitose de complexos imunes solúveis através de poços revestidos de clatrina.
• A coagregação com receptores de linfócitos B (BCR), receptores de linfócitos T (TCR) ou receptores Fc reduz a ativação de linfócitos B, linfócitos T e mastócitos, respectivamente.
• Localiza-se na membrana celular, também é encontrado no citoplasma, associado ao citoesqueleto, e uma isoforma secretada (IIB3) é liberada por macrófagos no soro.
• É amplamente expresso em células hematopoiéticas; a isoforma IIB1 é expressa preferencialmente na linhagem linfoide, a IIB2 na linhagem mieloide e a IIB3 é solúvel no soro.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, fosforilação, pontes dissulfeto, e a presença de um peptídeo sinal e domínio transmembrana; pertence à superfamília das imunoglobulinas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como um anticorpo monoclonal, espera-se desempenho consistente entre lotes. Titule o anticorpo para determinar a diluição de trabalho ideal para o seu tipo celular específico e condições experimentais.
• Para citometria de fluxo, inclua etapas adequadas de bloqueio de receptor Fc e controles de isotipo para minimizar a ligação não específica, especialmente ao usar células com alta expressão de receptor Fc.
• O conjugado APC oferece fluorescência brilhante adequada para painéis multicoloridos; certifique-se de incluir controles de compensação adequados ao combinar com outros fluoróforos.
• As isoformas de CD32 são expressas de forma diferenciada; se a detecção específica de isoforma for necessária, valide em seu sistema modelo usando literatura ou métodos alternativos.
• A coloração de superfície celular com este anticorpo pode exigir otimização dos protocolos de fixação e permeabilização para coloração intracelular combinada.

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