APC Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Mouse CD366 (TIM-3) para Citometria de Fluxo - Q8VIM0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD366 (TIM-3)

• O homólogo do receptor celular 2 do vírus da hepatite A (HAVCR2), também conhecido como proteína 3 contendo domínio de imunoglobulina e mucina de células T (TIM-3) ou proteína de membrana 3 de células T, é uma glicoproteína transmembrana do tipo I pertencente à superfamília das imunoglobulinas. O splicing alternativo produz isoformas, e a sequência canônica de camundongo tem um peso molecular calculado de aproximadamente 31 kDa (22 kDa observado devido à glicosilação).
• Funciona como um receptor imunomodulador com papéis geralmente inibitórios, suprimindo respostas autoimunes e aloimunes mediadas por células T auxiliares do tipo 1 (Th1) e promovendo tolerância imunológica (PubMed:14556006, PubMed:18006747). Em células T CD8+, atenua a sinalização do TCR bloqueando as atividades dos promotores NF-kappaB e NFAT, reduzindo a secreção de IL-2 (Por similaridade). Referências relacionadas: PMID:14556006 PMID:18006747
• No entanto, funções ativadoras dependentes do contexto foram relatadas, incluindo o aumento da sinalização do TCR em células T via ZAP70, LCP2, LCK e FYN (PubMed:21807895) e o aumento das respostas de células T CD8+ durante infecção aguda (PubMed:24567532). Em células natural killer (NK), atua como um coreceptor para aumentar a produção de IFN-gama, mas também pode suprimir a citotoxicidade dependendo das condições (PubMed:25337993). Referências relacionadas: PMID:21807895 PMID:24567532 PMID:25337993
• O TIM-3 é um receptor para LGALS9 (galectina-9). Esta interação leva à supressão das respostas de células T e à apoptose através da fosforilação de HAVCR2 e dissociação de BAG6 (PubMed:22863785). Também contribui para a imunidade inata estimulando a secreção de IL-1β por macrófagos e restringindo o crescimento bacteriano intracellular ao se ligar à LGALS9 em macrófagos infectados por Mycobacterium tuberculosis (PubMed:20937702). Referências relacionadas: PMID:22863785 PMID:20937702
• Além disso, o TIM-3 liga-se à fosfatidilserina (PtSer) de maneira dependente de cálcio, mediando a fagocitose de células apoptóticas por células dendríticas (PubMed:20083673, PubMed:19224762). Em células dendríticas infiltrantes de tumores, suprime respostas imunes inatas mediadas por ácidos nucleicos interagindo com HMGB1 (PubMed:22842346). Referências relacionadas: PMID:20083673 PMID:19224762 PMID:22842346
• A localização subcelular inclui a membrana plasmática, junções celulares e uma forma secretada. Modificações pós-traducionais incluem pontes dissulfeto, glicosilação e fosforilação, que regulam sua função e interações de sinalização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao domínio extracelular (aminoácidos 20-191), garantindo o reconhecimento do receptor nativo na superfície celular, adequado para citometria de fluxo.
• Considere titular o anticorpo para determinar a concentração ideal de coloração para seu tipo de célula específico, pois os níveis de expressão de TIM-3 variam com o estado de ativação.
• Como o TIM-3 é expresso em células T ativadas, macrófagos, células dendríticas, células NK e mastócitos, valide o anticorpo no sistema de amostra relevante e inclua controles de isotipo apropriados.
• Para citometria de fluxo, use um corante de viabilidade para excluir células mortas, pois o TIM-3 pode ligar-se à fosfatidilserina em células apoptóticas, potencialmente causando coloração inespecífica.

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