Anticorpo Monoclonal APC/Cianina7 Coelho anti-Humano/Macaco CD8a para Citometria de Fluxo - P01732

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD8a

• A cadeia alfa da glicoproteína de superfície de linfócitos T (CD8A) é uma glicoproteína de membrana integral que atua como coreceptor para moléculas MHC de classe I. Ela interage com o receptor de linfócito T (TCR) e o MHC I em células apresentadoras de antígeno, recrutando a quinase Src LCK para ativar vias de sinalização intracelular essenciais para a ativação de linfócitos T e respostas citotóxicas.
• CD8A pode existir como um heterodímero ligado por pontes dissulfeto com CD8B ou como um homodímero. Os heterodímeros são típicos em linfócitos T derivados do timo, enquanto os homodímeros são expressos em células NK, linfócitos T de memória, linfócitos intraepiteliais, monócitos e células dendríticas.
• Esse mecanismo de coreceptor permite que linfócitos T citotóxicos (CTLs) reconheçam e eliminem células infectadas ou tumorais, desempenhando um papel fundamental na imunidade adaptativa contra ameaças externas e internas.
• Em células NK, os homodímeros de CD8A promovem a sobrevivência e facilitam a conjugação com múltiplas células alvo, aumentando a lise serial.
• CD8A é expressa em um subconjunto de células natural killer, linfócitos T de memória e células dendríticas plasmocitóides, estas últimas após estimulação viral como o vírus do herpes simplex tipo 1, destacando seu papel na defesa imune inicial.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo formação de pontes dissulfeto, glicosilação e palmitoilação, que são essenciais para a localização na membrana e sua função. O splicing alternativo gera isoformas tanto ligadas à membrana quanto secretadas.
• A localização subcelular inclui a membrana celular e a secreção extracelular; um peptídeo sinal direciona sua síntese para a via secretora.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, uma diluição inicial típica de 1:50 a 1:200 costuma ser eficaz; realize a titulação no tipo de célula relevante para determinar a concentração ideal.
• Utilize controles de compensação adequados e proteja o anticorpo conjugado da exposição prolongada à luz para manter a estabilidade do fluoróforo.
• Coloração de células vivas deve ser feita em tampão de coloração resfriado, sem permeabilização, pois CD8a é um antígeno de superfície celular.
• Inclua controle de isotipo ou coloração de marcador congenérico para a gateagem precisa das populações CD8+, especialmente ao analisar subconjuntos de linfócitos T ou células NK.
• Este anticorpo foi validado para reconhecer CD8a tanto de humanos quanto de macacos cynomolgos. Usuários que trabalham com espécies cruzadas devem confirmar a reatividade em seu sistema experimental específico.

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