Anticorpo monoclonal coelho APC/Cianina7 anti-IgD humano/macaco para citometria de fluxo - P01880

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do IgD

• IgD é a região constante das cadeias pesadas delta, existindo tanto na forma ligada à membrana (mIgD) quanto secretada (sIgD), e funciona como o principal receptor de antígeno nas células B periféricas, geralmente co-expresso com IgM. Referências relacionadas: PMID:20176268, PMID:22158414
• A ligação do antígeno ao mIgD desencadeia a expansão clonal das células B e sua diferenciação em plasmócitos, um processo que envolve a fosforilação de CD79A e CD79B pelas quinases da família Src. Referências relacionadas: PMID:20176268, PMID:22158414
• A concentração de IgD solúvel no soro é menor que a de IgG, IgA e IgM, mas maior que a de IgE, e sua secreção é regulada negativamente após a ativação do receptor de células B.
• IgD é um potente indutor de citocinas pró-inflamatórias (TNF, IL1B, IL1RN) e outras citocinas (IL6, IL10, LIF) em monócitos do sangue periférico. Referências relacionadas: PMID:10702483, PMID:11282392, PMID:8774350
• Os domínios variáveis do IgD são montados por recombinação V(D)J e sofrem mutação somática hiperativa, permitindo a maturação de afinidade para antígenos. Referências relacionadas: PMID:17576170, PMID:20176268
• Múltiplas isoformas da cadeia pesada do IgD são produzidas por splicing alternativo; a proteína é N-glicosilada e apresenta pontes dissulfeto intra e intercadeia conservadas.
• A localização subcelular inclui a membrana plasmática (para mIgD) e a secreção (para sIgD); a forma transmembrana contém uma única hélice transmembrana.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 99–384 do IgD humano, que compreende uma porção substancial da região extracelular; esse desenho pode favorecer o reconhecimento do IgD nativo de superfície nas células B.
• Dada a reatividade verificada com humanos e macacos cynomolgus, recomenda-se validar o desempenho em amostras relevantes de sangue periférico ou tecido linfoide dessas espécies.
• O conjugado APC/Cianina7 é compatível com linhas de laser vermelhas padrão (633–647 nm); certifique-se de usar conjuntos de filtros adequados e controles de compensação em painéis de citometria de fluxo multicolorida.
• Ao realizar co-marcação com IgM ou outros marcadores de células B, verifique se o protocolo de fixação e permeabilização não interfere no epitopo extracelular reconhecido por esse clone.
• Como qualquer reagente para citometria de fluxo, realize a titulação do anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu sistema experimental específico.

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