APC/Cianina7 Anticorpo Monoclonal de Rato anti-Mouse CD45R/B220 para FC - P06800

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD45R/B220 (CD45)

• O CD45, designado proteína tirosina-fosfatase C de tipo receptor, é uma glicoproteína transmembrana também conhecida como antígeno comum de leucócitos (L-CA), Ly-5 ou T200. Serve como um regulador crítico da ativação e diferenciação de linfócitos.
• Como uma tirosina-fosfatase, o CD45 é essencial para a ativação de células T através do receptor de antígeno. Regula positivamente a coativação de células T ao se ligar ao DPP4, facilitando a transdução de sinais.
• A região intracelular contém dois domínios de fosfatase em tandem. O primeiro domínio (D1) possui atividade catalítica, enquanto o segundo domínio (D2) influencia a especificidade do substrato do D1, ajustando finamente a saída do sinal.
• Durante a ativação de células T, o CD45 recruta e desfosforila moléculas de sinalização chave, incluindo SKAP1 e FYN. Também desfosforila o LYN, modulando assim a atividade da quinase LYN e as vias de sinalização a jusante.
• Na interface entre células apresentadoras de antígeno e células T, o CD45 interage com o CLEC10A em células dendríticas imaturas. Esta interação, envolvendo CD45 carregando antígeno Tn em células T efetoras, modula o limite de ativação de células T para limitar a autoreatividade.
• O CD45 está localizado na membrana celular, jangos de membrana e sinapses imunológicas, posicionando-o no centro da sinalização imunológica. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas; a isoforma B220, reconhecida por este anticorpo, é predominantemente expressa em linfócitos B e é um marcador clássico de linhagem de células B.
• Palavras-chave: splicing alternativo, membrana celular, glicoproteína, hidrolase, membrana, fosfoproteína, proteína fosfatase, sinapse, transmembrana, hélice transmembrana.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo é fornecido como um conjugado de APC/Cianina7, otimizado para citometria de fluxo (FC). Verifique as compensações de fluorescência usando controles de coloração única e inclua um controle de isotipo apropriado para definir os limites de gating.
• O imunógeno consiste em proteína recombinante de CD45R/B220 de camundongo. Para coloração ideal, titule o anticorpo na matriz biológica relevante (por exemplo, suspensões celulares de baço ou linfonodo de camundongo) para determinar a concentração que rende o sinal específico máximo com fundo mínimo.
• Considere realizar o design de painel multicolorido com cuidado para evitar sobreposição espectral; o APC/Cianina7 é tipicamente excitado por um laser de 635 nm e emite no canal vermelho distante, exigindo compensação com outros fluoróforos nessa faixa.
• Valide a expressão no sistema de amostra pretendido, como tecidos linfoides de camundongo, onde o B220 é altamente expresso em células B. Para aplicações não padronizadas, recomenda-se a realização de experimentos piloto.

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