APOA1 Coelho pAb para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02647

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do APOA1

• A Apolipoproteína A-I (APOA1) é o principal componente proteico da lipoproteína de alta densidade (HDL) plasmática e também é encontrada em quilomícrons.
• Desempenha um papel central no transporte reverso de colesterol, promovendo o efluxo de colesterol dos tecidos e atuando como cofator para a lecitina colesterol aciltransferase (LCAT), facilitando a esterificação e a depuração do colesterol.
• Como parte do complexo proteína ativadora de espermatozoides do plasma seminal (SPAP), o APOA1 contribui para a ativação da motilidade dos espermatozoides.
• O APOA1 é uma proteína secretada sintetizada principalmente no fígado e no intestino delgado, circulando no plasma como componente das partículas de HDL.
• A proteína sofre modificações oxidativas na Met-110 e Met-136; essas formas oxidadas estão elevadas em indivíduos com maior risco de doença arterial coronariana, incluindo portadores do genótipo eNOSa/b e fumantes, e são enriquecidas em lesões aórticas com o aumento da gravidade da doença.
• O APOA1 pertence a uma família de apolipoproteínas envolvidas no transporte e metabolismo de lipídios, com anotações ligando-o ao metabolismo do colesterol, metabolismo de esteroides e aterosclerose.
• Modificações pós-traducionais incluem glicação, fosforilação, palmitoilação e nitração, que podem modular sua função e papéis patológicos em amiloidose e neuropatia.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à sequência da proteína madura (aminoácidos 25-267), cobrindo uma grande porção do APOA1; esta região é conservada entre humano, camundongo e rato, apoiando a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blotting, prevê-se que o APOA1 migre aproximadamente a 28 kDa, mas modificações pós-traducionais e associação com partículas de HDL podem causar desvios; valide o tamanho da banda em seu sistema de amostra usando controles positivos apropriados (ex.: plasma humano, lisados de fígado).
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), o APOA1 está primariamente localizado no espaço extracelular e no citoplasma de hepatócitos e enterócitos; otimize a recuperação antigênica e considere a co-coloração com marcadores de HDL para confirmar a especificidade.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), observe que o APOA1 é secretado; a coloração intracelular pode refletir proteína recém-sintetizada no retículo endoplasmático/Complexo de Golgi; use condições sem soro ou pulse-chase para melhorar a detecção.
• O anticorpo foi validado para ELISA; devido à sua natureza policlonal, pode reconhecer múltiplos epítopos, potencialmente oferecendo sensibilidade aumentada em configurações de ELISA sanduíche quando emparelhado com um anticorpo de captura adequado.
• Sempre inclua controles das espécies relevantes (humano, camundongo, rato) e tecidos (fígado, intestino delgado, plasma) para confirmar a especificidade experimental.

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