Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Histon H3 (R17) Dimetilado Assimétrico – Q16695/P68431 | WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A Histona H3 é um componente central do nucleossoma, que envolve e compacta o DNA em cromatina. Este empacotamento limita a acessibilidade do DNA às maquinarias celulares necessárias para processos como transcrição, reparação de DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossómica. As histonas desempenham, portanto, um papel central na regulação da expressão génica e na integridade do genoma. Referências relacionadas: UniProtKB Q16695 / P68431

A função das histonas é fortemente regulada por um conjunto diversificado de modificações pós-traducionais (PTMs), frequentemente referidas como o "código das histonas". Estas PTMs incluem acetilação, metilação, fosforilação e ubiquitinação, entre outras, e orquestram a remodelação do nucleossoma e o recrutamento de proteínas efetoras. Entre estas modificações, a metilação da arginina - particularmente a dimetilação assimétrica - é uma marca epigenética chave associada à ativação e silenciamento transcricional.

A Histona H3 existe como múltiplas isoformas. A H3.1 (P68431) dependente da replicação é expressa amplamente em vários tecidos, enquanto a H3.1t (Q16695) é expressa especificamente em células testiculares, sugerindo funções especializadas na espermatogénese. Ambas as isoformas localizam-se no núcleo e nos cromossomas.

A dimetilação assimétrica da histona H3 na arginina 17 (R17; posição 18 na sequência precursora incluindo a metionina iniciadora) é catalisada pela proteína arginina metiltransferase CARM1 (PRMT4). Esta modificação tem sido implicada na regulação transcricional e é um marcador bem estudado de estados de cromatina ativa. Referências relacionadas: PMID:15345777, PMID:15471871, PMID:16497732

Este anticorpo reconhece especificamente a histona H3 quando esta está dimetilada assimetricamente na R17. Não deteta H3 não modificada ou outros estados de metilação, como arginina dimetilada simetricamente ou monometilada neste local, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudar a sinalização mediada pela CARM1 e a regulação epigenética.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético desenhado em torno da dimetilarginina assimétrica na R17 da histona H3 humana. Ao realizar western blotting (WB) ou imunohistoquímica (IHC-P), considere usar lisados celulares ou de tecidos conhecidos por expressar esta modificação (por exemplo, células HeLa ou testículos de rato) como controlos positivos.
• Como se prevê que este anticorpo tenha uma ampla reatividade cruzada para além de humano, rato e rato, pode ser adequado para detetar a modificação noutras espécies. No entanto, recomenda-se a validação no sistema de amostra relevante.
• Para ELISA, garanta que o antigénio de revestimento contém o epítopo dimetil-R17 assimétrico, uma vez que o anticorpo não reconhecerá peptídeos não modificados ou diferentemente metilados.
• Como o anticorpo é policlonal, a variabilidade entre lotes é uma consideração; inclua controlos negativos apropriados (por exemplo, peptídeo H3 não modificado) para confirmar a especificidade.

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