Anticorpo de Coelho pAb Anti-Histona H3-R26 Asimetricamente DiMetilada (Q16695 / P68431) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, que envolve e compacta o DNA em cromatina. Esta estrutura limita a acessibilidade do DNA aos maquinários celulares que requerem DNA como modelo, desempenhando assim um papel central na regulação da transcrição, reparo de DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é regulada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs) das histonas, coletivamente referidas como "código das histonas", bem como por meio do remodelamento do nucleossomo.

A histona H3.1 canônica, codificada por múltiplos genes incluindo H3C1, H3C2, H3C3, etc., é amplamente expressa. Em contraste, a histona H3.1t (também conhecida como H3-4 ou HIST3H3) é especificamente expressa em células testiculares.

No nível subcelular, a histona H3 localiza-se principalmente no núcleo e nos cromossomos.

A histona H3 sofre extensas e variadas PTMs, incluindo acetilação, metilação, fosforilação, citrulinização e outras. Resíduos de arginina podem ser metilados para formar dimetilarginina assimétrica (ADMA) por proteinas arginina metiltransferases (PRMTs) como PRMT6 e CARM1, que atuam em resíduos específicos (por exemplo, R3, R18) e modulam a estrutura da cromatina e a expressão gênica. Este anticorpo foi projetado para reconhecer especificamente a dimetilação assimétrica na arginina 26 (R26) da histona H3.

Referências relacionadas: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:15345777, PMID:15471871

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético contendo R26 assimetricamente dimetilada, projetado para conferir alta especificidade para esta modificação. Os pesquisadores devem considerar verificar a especificidade usando ensaios de competição com peptídeos e comparando sinais com peptídeos não modificados ou diferentemente modificados.
• Para Western blotting, espera-se uma banda específica em aproximadamente 15 kDa. Extratos enriquecidos em histonas ou proteínas extraídas com ácido podem melhorar a detecção. Controles positivos derivados de células tratadas com inibidores de histona desacetilase (por exemplo, butirato de sódio) podem ajudar a confirmar a reatividade.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), as condições ideais de permeabilização e fixação devem ser determinadas. Dada a ampla reatividade cruzada prevista, recomenda-se validação na espécie e tecido específicos de interesse.
• Para aplicações de ELISA, use o peptídeo imunizante como controle positivo e um peptídeo não modificado como controle negativo para confirmar a ligação específica da modificação.
• Como com todos os anticorpos específicos para modificações pós-traducionais, a consistência entre lotes e as condições de reação devem ser monitoradas no contexto do sistema experimental específico.

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