Anticorpo monoclonal de coelho DiMetil-Histona H3-R8 Assimétrica (Q16695/P68431) para Pesquisa em Epigenética

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, enrolando e compactando o DNA em cromatina para limitar a acessibilidade para transcrição, replicação e reparo. Através de uma complexa gama de modificações pós-traducionais (PTMs), as histonas desempenham um papel central na regulação da expressão gênica, reparo de DNA, replicação de DNA e estabilidade cromossômica — um fenômeno frequentemente referido como o código da histona.

A dimetilação assimétrica de resíduos de arginina (Rme2a) nas caudas das histonas, incluindo em R8 da Histona H3, é catalisada por proteinil-arginina metiltransferases (PRMTs) e contribui para a ativação ou silenciamento transcricional, dependendo do contexto genômico. Esta modificação específica faz parte de uma paisagem epigenética mais ampla que governa a dinâmica da cromatina.

Duas principais variantes da Histona H3 são alvo deste anticorpo: Histona H3.1t (codificada por H3-4/HIST3H3, UniProt Q16695) e a Histona H3.1 canônica (codificada por múltiplos genes H3C, UniProt P68431). Embora a Histona H3.1 seja amplamente expressa, a Histona H3.1t apresenta expressão específica nos testículos. Ambas as variantes se localizam no núcleo e no cromossomo.

Referências relacionadas: UniProt:Q16695, UniProt:P68431

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Western Blot (WB): Espera-se uma única banda em torno de 15 kDa. Use extratos nucleares ou histonas extraídas com ácido como controles positivos. Considere incluir a competição com peptídeo não modificado para confirmar a especificidade para a modificação dimetil-R8 assimétrica.
• Dot Blot (DB): Aplique antígenos peptídicos (dimetil-R8 assimétrico vs. não modificado ou dimetil-R8 simétrico) para avaliar a especificidade do anticorpo.
• Imuno-histoquímica (IHC-P): A recuperação de antígeno com tampão citrato (pH 6,0) é recomendada. Valide o sinal em tecidos conhecidos por expressar H3R8me2a e use controles de isotipo para confirmar a especificidade da coloração.
• ELISA: Adequado para formatos de ELISA direto e sanduíche. Otimize as concentrações de revestimento com o peptídeo imunógeno.
• Todas as diluições e condições devem ser determinadas empiricamente para o sistema experimental específico.

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