Anticorpo policlonal de Coelho Anti-Asymmetric DiMethyl-Histone H3-R8 (Q16695 / P68431) – Validado para WB, IHC-P, ChIP, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3 (Asymmetric Dimethyl-R8)

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, que envolve e compacta o DNA em cromatina, limitando a acessibilidade do DNA às maquinarias celulares. As histonas desempenham um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é regulada dinamicamente por meio de um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs), coletivamente conhecidas como código de histonas, e pelo remodelamento do nucleossomo. Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Entre as numerosas PTMs na histona H3, a metilação da arginina é catalisada por proteína arginina metiltransferases (PRMTs) e pode ocorrer em formas assimétricas ou simétricas. A dimetilação assimétrica de H3R2 é mediada pela PRMT6 PMID:17898714, enquanto a dimetilação assimétrica de H3R17 é catalisada pela CARM1 PMID:15345777. Sabe-se que o resíduo H3R8 é simetricamente dimetilado pela PRMT5; no entanto, a dimetilação assimétrica de H3R8 também foi relatada como uma marca epigenética específica. Este anticorpo tem como alvo o estado de dimetilação assimétrica no R8, permitindo a discriminação desta modificação.

A histona H3 está localizada no núcleo e na cromatina. A isoforma canônica H3.1 (P68431) é expressa de forma ubíqua, enquanto a variante H3.1t (Q16695) é expressa especificamente em células testiculares. Referências relacionadas: PMID:16567635 (citrulinação em R8/R2/R17)

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético contendo dimetilação assimétrica no R8; espera-se que o anticorpo reconheça especificamente esta modificação. No entanto, devido à homologia de sequência, pode ocorrer reatividade cruzada com outras variantes ou sítios de histona H3 metilados. Valide a especificidade usando competição com peptídeo, nocaute/silenciamento ou mutagênese sítio-dirigida.
• Para Western blot, o peso molecular esperado é ~15 kDa. As histonas são altamente básicas; use géis ácido-ureia ou inclua controles apropriados para resolver as formas modificadas.
• Para ChIP, considere que a dimetilação assimétrica de H3R8 pode marcar estados de cromatina específicos; otimize as condições de reticulação e cisalhamento.
• As aplicações listadas incluem WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA e ChIP. As diluições devem ser determinadas empiricamente, e todos os ensaios devem incluir controles negativos e positivos apropriados.
• A reatividade cruzada é prevista contra humano, rato, rato e outras espécies devido à alta conservação da histona H3. Verifique no sistema de amostra relevante.

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