Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Asymmetric DiMethyl-Histone H4-R3 (P62805) para WB, IHC-P, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

A histona H4 é um componente central do nucleossomo, a unidade fundamental da cromatina. Juntamente com as histonas H2A, H2B e H3, forma um octâmero em torno do qual o DNA é enrolado, compactando o genoma e regulando o acesso ao material genético. Este papel estrutural é essencial para a regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. As funções das histonas são altamente reguladas por uma complexa variedade de modificações pós-traducionais (PTMs), coletivamente referidas como "código das histonas", que alteram a dinâmica da cromatina e as interações proteicas.

A dimetilação assimétrica da histona H4 na arginina 3 (H4R3me2a) é uma PTM específica catalisada pela proteína arginina metiltransferase 1 (PRMT1). Esta modificação ocorre na cauda N-terminal flexível da H4 e tem sido implicada na ativação transcricional e regulação epigenética. A modificação cria um sítio de ancoragem para proteínas efetoras que interpretam a marca de metilação, influenciando assim os padrões de expressão gênica.

Referências relacionadas: PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

A histona H4 está predominantemente localizada no núcleo e está associada aos cromossomos durante todo o ciclo celular. Sua sequência altamente conservada em eucariotos ressalta sua importância biológica fundamental. Além da dimetilação assimétrica, a cauda N-terminal da H4 sofre muitas outras modificações, incluindo acetilação, fosforilação e dimetilação simétrica, que orquestram coletivamente a função da cromatina.

Este anticorpo reconhece especificamente a marca de dimetilação assimétrica no R3, permitindo o estudo detalhado desta modificação epigenética em vários contextos biológicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo sintético contendo a modificação dimetil-R3 assimétrica. Para confirmar a especificidade do anticorpo, considere realizar ensaios de competição com peptídeo usando peptídeos metilados e não metilados.
• Para Western blotting, recomenda-se um protocolo padrão de extração de histonas para enriquecer proteínas ligadas à cromatina. O peso molecular previsto da histona H4 é ~11 kDa. Execute SDS-PAGE em condições apropriadas (por exemplo, gel a 15%) para resolução ideal de histonas de baixo peso molecular.
• Na imuno-histoquímica (parafina), pode ser necessária a recuperação antigênica. Otimize o método de recuperação e a diluição do anticorpo usando controles de tecido positivo e negativo apropriados.
• Prevê-se que este anticorpo tenha reatividade cruzada com humano, camundongo, rato e outras espécies. No entanto, a reatividade cruzada em seu sistema experimental específico deve ser verificada usando controles disponíveis.
• Como com qualquer anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser avaliada para ensaios quantitativos críticos. Considere incluir um controle de carga, como histona H4 total ou uma proteína constitutiva.

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