Anticorpo Policlonal de Coelho ATF1 para WB, IP, ELISA - P18846

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ATF-1

• O ATF-1 (Fator de Transcrição Ativador 1) é um fator de transcrição dependente de AMP cíclico codificado pelo gene ATF1, pertencente à família CREB/ATF de fatores de transcrição de alavanca de leucina básica (bZIP).
• Liga-se ao elemento de resposta ao cAMP (CRE; consenso 5'-GTGACGT[AC][AG]-3') encontrado em muitos promotores virais e celulares, e também ao elemento responsivo ao Tax (TRE) do HTLV-I.
• O ATF-1 media o estímulo induzido pela proteína quinase A (PKA) de genes repórter CRE, ligando a sinalização do cAMP à expressão gênica.
• Atua como um repressor transcricional de genes de desintoxicação antioxidante, como o FTH1, implicando-o em respostas ao estresse oxidativo.
• O ATF-1 desencadeia a proliferação e transformação celular e está envolvido em rearranjos cromossômicos em malignidades (por exemplo, fusões EWS-ATF1 e FUS/ATF-1).
• A proteína está localizada exclusivamente no núcleo, consistente com o seu papel como fator de transcrição.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação (fosfoproteína) e ubiquitinação (conjugação Ubl), e sofre splicing alternativo.
• Palavras-chave da Uniprot destacam as suas funções: ligação ao DNA, ativador, regulação da transcrição e o seu envolvimento em rearranjo cromossômico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado foi uma proteína de fusão recombinante cobrindo os aminoácidos 1-210 do ATF1 humano, que inclui a região N-terminal. Esta região é bem conservada e pode ser adequada para detectar a proteína ATF-1 total, mas a reatividade cruzada com outros membros da família intimamente relacionados (como o CREB) deve ser avaliada por alinhamento de sequência.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto é de 29 kDa; considere o uso de porcentagens apropriadas de gel e controles de carregamento. Valide a especificidade usando linhagens celulares relevantes (por exemplo, HeLa, HEK293) e tecidos de camundongo.
• Para imunoprecipitação (IP), garanta a estabilidade do complexo anticorpo-antigénio; teste várias condições de tampão de lise para manter as interações proteicas.
• No ELISA, o uso de um padrão de peptídeo ou proteína pode ajudar a quantificar os níveis de ATF-1; verifique a linearidade e a sensibilidade.

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