Anticorpo policlonal de coelho anti-ATF6 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P18850

Especificações e parâmetros essenciais do produto

Contexto biológico: função e localização da ATF6

• A ATF6 é um precursor de fator de transcrição integrado à membrana do retículo endoplasmático (RE). O estresse do RE desencadeia seu processamento proteolítico, liberando o fragmento N-terminal ativo, que é translocado para o núcleo para iniciar a resposta a proteínas mal dobradas (UPR). Referências relacionadas: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464
• A ATF6 processada liga-se aos elementos de resposta ao estresse do RE (ERSE, 5'-CCAAT-N₉-CCAC[GA]-3' e ERSE II, 5'-ATTGG-N-CCACG-3') como um heterodímero com NF-Y, ativando genes-alvo da UPR. Referências relacionadas: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:11163209
• A ATF6 também pode regular a transcrição mediada pelo fator de resposta sérica e desempenha um papel no desenvolvimento da fóvea retiniana e na função dos cones. Referências relacionadas: PMID:10564271 PMID:11158310 PMID:11779464 PMID:26029869
• Localização subcelular: o precursor reside nas membranas do RE e do aparelho de Golgi; após o processamento, o domínio do fator de transcrição localiza-se no núcleo.
• A ATF6 é expressa ubiquamente nos tecidos humanos.
• O precursor é uma glicoproteína ligada a N e pode ser modificado por ubiquitinação. A proteína é uma proteína de membrana do tipo II de passagem única (âncora de sinal), com o N-terminal voltado para o citoplasma e o C-terminal no lúmen do RE.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo localizado entre os aminoácidos 600-670 da ATF6 humana (NP_031374.2), situado no domínio luminal C-terminal. Essa região está presente no precursor de comprimento total (~75 kDa). A detecção da forma nuclear clivada (~50 kDa) pode variar dependendo da acessibilidade do epítopo; valide em modelos apropriados de estresse do RE.
• Para Western blot, espera-se uma banda próxima de 75 kDa para o precursor. Trate as células com indutores de estresse do RE (por exemplo, tunicamicina e tapsigargina) para observar o processamento e a translocação nuclear.
• Para IHC-P, considere a recuperação antigênica com tampão de citrato ou EDTA e confirme a especificidade do sinal com controles adequados.
• Em IF/ICC, a ATF6 apresenta um padrão reticular de RE/Golgi em condições basais e redistribui-se para o núcleo após a indução do estresse; utilize fixação e permeabilização adequadas.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção; otimize as condições de revestimento e bloqueio.

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