Anticorpo Policlonal de Coelho ATP6V1A para WB, ELISA - P38606

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do ATP6V1A

• O ATP6V1A codifica a subunidade catalítica A do domínio V1 da H+-ATPase vacuolar (V-ATPase), uma enzima multissubunidade que acopla a hidrólise de ATP ao translocação de prótons (PMID:8463241, PMID:22053050). Nomes alternativos conhecidos incluem subunidade V-ATPase 69 kDa, isoforma ATPase vacuolar VA68 e subunidade alfa da bomba de prótons vacuolar. Referências relacionadas: PMID:8463241 PMID:22053050

• O complexo V-ATPase é essencial para a acidificação e manutenção do pH dos compartimentos intracelulares, e em certos tipos de células, localiza-se na membrana plasmática para promover a acidificação extracelular (PMID:32001091). Referências relacionadas: PMID:32001091

• Na membrana lisossomal, a V-ATPase ativa o mTORC1 promovendo a atividade do fator de troca de nucleotídeos de guanina do complexo Ragulator (PMID:22053050). Referências relacionadas: PMID:22053050

• Sob condições aeróbicas, o ATP6V1A contribui para a homeostase intracelular de ferro, desencadeando a atividade das enzimas proil hidroxilases Fe(2+) (PHD), que hidroxilam a HIF1A e a marcam para degradação proteassomal (PMID:28296633). Referências relacionadas: PMID:28296633

• A proteína pode desempenhar um papel no desenvolvimento de neuritos e na conectividade sináptica (PMID:29668857). Referências relacionadas: PMID:29668857

• O ATP6V1A é predominantemente citosólico, mas também se localiza em vesículas revestidas de clatrina, vesículas secretoras e membranas lisossomais.

• Alta expressão proteica é observada na pele. Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, e o splicing alternativo gera múltiplas isoformas. O gene está associado a doenças como epilepsia.

• Durante a infecção pelo vírus da raiva, o ATP6V1A facilita o desencapsulamento do vírion interagindo com as proteínas de matriz M virais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético mapeado para os aminoácidos 500–600 do ATP6V1A humano (NP_001681.2). Esta região pode ser conservada entre espécies, consistente com a reatividade cruzada em camundongos relatada.

• Para Western blot, espera-se uma banda que migre próximo de 68 kDa. Valide a especificidade do anticorpo usando controles de knockdown ou knockout no sistema celular ou de tecido relevante.

• As condições de ELISA devem ser otimizadas com a proteína recombinante ATP6V1A ou padrões de peptídeo, e a ligação inespecífica pode ser reduzida com tampões de bloqueio apropriados.

• Uma vez que a V-ATPase é expressa ubiquamente, mas enriquecida na pele, lisados de queratinócitos ou fibroblastos humanos podem servir como controles positivos.

• Se estender para IHC ou IF, considere o epítopo alvo do anticorpo em um contexto de proteína dobrada e verifique o desempenho em condições nativas.

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