Anticorpo Monoclonal Anti-Mouse CD117/c-Kit Conjugado com Biotina para Citometria de Fluxo - P05532

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD117/c-Kit

• O receptor do fator de crescimento de mastócitos/células-tronco Kit (CD117/c-Kit) é uma tirosina-proteína quinase transmembrana do tipo III codificada pelo proto-oncogene Kit, servindo como receptor para a citocina KITLG/SCF.
• Após a ligação do ligante, o Kit ativa múltiplas vias de sinalização a jusante, incluindo as cascatas PI3K/AKT, RAS/MAPK e JAK/STAT, para regular a sobrevivência, proliferação e diferenciação celular.
• O Kit desempenha papéis essenciais na hematopoiese, manutenção de células-tronco, gametogênese, desenvolvimento, migração e função de mastócitos, e melanogênese.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas com distribuições teciduais distintas: a isoforma 1 é amplamente expressa, enquanto a isoforma 3 é enriquecida em células-tronco hematopoiéticas.
• Subcelularmente, o Kit localiza-se principalmente na membrana celular, mas sofre internalização e localização citoplasmática após a ativação.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação ligada a N e fosforilação dependente de ligante em resíduos de tirosina chave, que são críticas para a atividade da quinase e propagação do sinal.
• Como proto-oncogene, mutações ativadoras e expressão desregulada de KIT estão implicadas em várias malignidades, destacando sua importância como alvo terapêutico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre o domínio extracelular (aminoácidos 25–523) do CD117/c-Kit de camundongo, sugerindo que o anticorpo é adequado para detectar o receptor expresso na superfície em citometria de fluxo de células vivas.
• Para citometria de fluxo, emparelhe este anticorpo primário biotinilado com um reagente secundário de estreptavidina conjugado com fluoróforo; titule ambos para alcançar o índice de coloração ideal para o seu tipo de célula específico.
• Inclua controles apropriados, como anticorpo biotinilado de mesma isotipo e, se disponível, células de camundongos com knockout de Kit ou bloqueio com KITLG/SCF recombinante para confirmar a especificidade.
• Considere testar a reatividade cruzada com humanos ou outras espécies, se necessário, mas note que este anticorpo é relatado como reativo com camundongo; a validação em outras espécies é de responsabilidade do usuário.
• Embora não listado, o anticorpo pode funcionar em outras aplicações, como imuno-histoquímica ou imunoprecipitação; o desempenho deve ser validado empiricamente no sistema de amostra relevante.

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