Anticorpo Monoclonal Biotina Coelho anti-Humano/Macaco CD14 para FC - P08571

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD14

• Antígeno de diferenciação de monócitos CD14, também conhecido como antígeno My23 ou glicoproteína rica em leucina específica de células mieloides, é expresso em monócitos, macrófagos e fracamente em granulócitos.
• O CD14 atua como coreceptor para o lipopolissacarídeo bacteriano (LPS), cooperando com a LBP para entregar o LPS monomérico ao complexo LY96/TLR4, mediando assim as respostas imunes inatas. Referências relacionadas: PMID:1698311 PMID:23264655 PMID:20133493 PMID:22265692
• Após a ligação ao LPS, o CD14 desencadeia a sinalização dependente de MyD88/TIRAP/TRAF6, levando à ativação de NF-κB, secreção de citocinas e resposta inflamatória. Referências relacionadas: PMID:8612135
• O CD14 também funciona como coreceptor para os heterodímeros TLR2:TLR6 e TLR2:TLR1 em resposta a lipopeptídeos diacilados e triacilados, respectivamente; esses complexos sinalizam a partir da superfície celular e são subsequentemente direcionados ao Golgi por meio de uma via dependente de microdomínios lipídicos. Referências relacionadas: PMID:16880211
• Liga-se ao LDL eletronegativo (LDL(-)) e media a liberação de citocinas induzida por LDL(-). Referências relacionadas: PMID:23880187
• A localização subcelular inclui membrana celular, forma secretada, microdomínios lipídicos de membrana e aparelho de Golgi.
• Especificidade tecidual: detectado em macrófagos (em nível proteico), fortemente expresso em monócitos, fracamente em granulócitos e na maioria dos macrófagos teciduais. Referências relacionadas: PMID:1698311
• Características estruturais: contém repetições ricas em leucina, é uma glicoproteína ancorada por GPI com peptídeo sinal e tem peso molecular previsto de aproximadamente 40 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Use o anticorpo biotinilado para detecção direta por citometria de fluxo do CD14 de superfície em leucócitos humanos ou de macaco cynomolgus; garanta o bloqueio adequado do FcR para minimizar a ligação inespecífica.
• Valide os padrões de coloração usando populações celulares positivas (por exemplo, monócitos) e negativas (por exemplo, linfócitos) apropriadas; considere o uso de controles de isotipo.
• O marcador de biotina permite detecção flexível com conjugados fluorescentes de estreptavidina; titre o conjugado de estreptavidina para otimizar a relação sinal-ruído.
• Para detecção intracelular do CD14 no Golgi ou na via secretora, é necessária uma etapa de permeabilização; note que a aplicação principal é a coloração de superfície.
• Armazene o anticorpo nas condições frias recomendadas (envio com bolsa de gelo) e proteja da exposição prolongada à luz para manter a estabilidade do conjugado.

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