Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CD28 de Camundongo Biotinado para Citometria de Fluxo - P31041

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD28

• O CD28 é uma glicoproteína de superfície específica de células T que atua como um receptor coestimulador crítico para a ativação, proliferação e sobrevivência das células T, mantendo assim a homeostase imunológica. Referências relacionadas: PMID:7688139
• Após a ligação com seus ligantes CD80 (B7-1) ou CD86 (B7-2) em células apresentadoras de antígeno, o CD28 amplifica a sinalização do receptor de células T (TCR), levando ao aumento da produção de citocinas, particularmente a interleucina-2 (IL-2), tanto em subconjuntos de células T CD4+ quanto CD8+.
• Mecanisticamente, a ligação do CD28 recruta a proteína quinase C-teta (PRKCQ) e a GRB2, ativando a via NF-kappa-B através de cascatas dependentes e independentes de PI3K/Akt.
• Em conjunto com a ligação do TCR/CD3 e a coestimulação do CD40L, o CD28 promove a produção de IL-4 e IL-10, modulando a diferenciação das células T auxiliares (T-helper).
• O CD28 é uma glicoproteína de membrana do tipo I de passagem única localizada na membrana celular, apresentando um domínio extracelular semelhante a uma imunoglobulina, uma região transmembrana e uma cauda citoplasmática.
• A proteína está sujeita a modificações pós-traducionais, como glicosilação e fosforilação, conforme evidenciado por sua classificação como glicoproteína e fosfoproteína.
• O CD28 pertence à superfamília das imunoglobulinas e contém uma ligação dissulfeto conservada dentro de seu domínio extracelular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo biotinado para determinar a concentração ideal para o seu tipo de amostra (por exemplo, esplenócitos de camundongo ou linhagens de células T). Use um fluoróforo conjugado com estreptavidina para detecção.
• Inclua anticorpos de controle de isotipo apropriados para avaliar a ligação não específica.
• O CD28 é expresso na superfície celular das células T; garanta a viabilidade celular adequada e o bloqueio do receptor Fc para minimizar o ruído de fundo.
• Valide o desempenho do anticorpo em seu contexto experimental específico e considere o uso de controles de estimulação com PMA/ionomicina para verificar o status de ativação das células T.

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