Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Mouse IgM com Biotina para Citometria de Fluxo - P01872

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Imunoglobulina Pesada Constante mu (IgM)

• A imunoglobulina pesada constante mu (IgM) é a região constante da cadeia pesada mu, formando os braços de ligação ao antígeno dos anticorpos IgM. Ela é codificada pelo gene Ighm no locus da cadeia pesada da imunoglobulina.
• A IgM secretada (sIgM) multimeriza predominantemente em pentâmeros, com ocorrência ocasional de hexâmeros, permitindo ligação de alta avidez aos antígenos. Tanto a sIgM natural (polirreativa) quanto a imune (específica ao antígeno) são essenciais para respostas humorais eficazes, mediando o reconhecimento e a eliminação de patógenos via receptores Fc (ex: FCMR) e ativação do complemento (via clássica da C1q). Referências relacionadas: PMID:10899913, PMID:11062505, PMID:28135254, PMID:34788614
• A IgM ligada à membrana serve como componente do receptor de antígeno do complexo receptor de células B (BCR), fornecendo sinalização tônica constitutiva para a sobrevivência das células B e mediando a sinalização do pré-BCR que regula o desenvolvimento das células B e a exclusão alélica.
• A IgM é encontrada tanto secretada quanto na membrana celular. A sIgM é transportada através do epitélio mucoso via PIGR para a imunidade mucosa, enquanto a IgM de membrana está ancorada nas células B.
• Expressa especificamente em células da linhagem B: precursores de células B da medula óssea e células B-1 e B-2 maduras.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada e ligações dissulfeto intercadeias essenciais para polimerização e estabilidade estrutural. O splicing alternativo gera isoformas secretadas e ligadas à membrana, e a proteína contém domínios do tipo imunoglobulina, uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo conjugado com biotina detecta IgM de camundongo em citometria de fluxo. Use um reagente secundário estreptavidina-fluoróforo para amplificação do sinal. Considere titular tanto o anticorpo quanto o conjugado de estreptavidina para um índice de coloração ideal.
• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 105-454 da IgM de camundongo (região constante), permitindo o reconhecimento das formas secretadas e ligadas à membrana. Para coloração de superfície de células B, use células vivas, não fixadas, quando possível; a fixação pode alterar a acessibilidade do epítopo.
• Inclua controles de isotipo apropriados e bloqueio de Fc para minimizar a ligação inespecífica. A reatividade cruzada com outras classes de imunoglobulinas de camundongo não foi relatada, mas a validação no sistema de amostra relevante é recomendada.
• Para coloração intracelular de IgM, é necessária permeabilização; valide os protocolos de fixação/permeabilização para seu tipo de célula específico para preservar os epítopos.

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