Anticorpo Policlonal de Coelho BRD3 para WB, IHC-P, ELISA - Q15059

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BRD3

• O BRD3 (proteína contendo domínio bromo 3) é um membro da família de domínios bromo e extraterminais (BET), também conhecida como proteína semelhante ao RING3, codificada pelo gene BRD3.
• Funciona como um leitor de cromatina que reconhece e se liga especificamente a histonas acetiladas, regulando a expressão génica e a estrutura da cromatina. Referências relacionadas: PMID:18406326, PMID:22464331, PMID:27105114
• Recruta fatores de transcrição e coativadores para os promotores dos genes, facilitando o alongamento da transcrição pela RNA polimerase II. Referências relacionadas: PMID:29567837, PMID:32895492
• In vitro, liga-se a resíduos de lisina acetilados nas histonas H2A, H2B, H3 e H4. Referências relacionadas: PMID:18406326
• Envolvido na diferenciação do endoderma ao sofrer separação de fase líquido-líquido ao se ligar ao lncRNA DIGIT, melhorando a ligação ao H3K18ac e induzindo a expressão de genes do endoderma. Referências relacionadas: PMID:32895492
• Localiza-se no núcleo e associa-se aos cromossomas.
• Expresso de forma ubíqua nos tecidos.
• Modificado pós-traducionalmente por acetilação, fosforilação e ubiquitinação; contém dois domínios bromo e uma região de enrolamento em hélice (coiled-coil).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange os aminoácidos 150-305, englobando a região C-terminal do domínio bromo 1 e o ligante ao domínio bromo 2. Este design pode conferir reatividade contra isoformas do BRD3 de comprimento total e truncadas.
• Para Western blot, espera-se uma banda em aproximadamente 80 kDa; valide a deteção no seu sistema de amostras específico e considere o uso de controlos positivos apropriados (por exemplo, lisados de HeLa, HEK293T) e quantidades de carregamento (por exemplo, 20–30 µg de proteína total).
• Na imuno-histoquímica-parafina (IHC-P), são recomendados métodos de recuperação de antigénio (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0) e otimização da concentração do anticorpo primário e condições de incubação; valide em tecidos conhecidos por expressar BRD3.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou deteção; as concentrações ótimas de revestimento e deteção devem ser determinadas experimentalmente.
• Foi notada reatividade cruzada com BRD3 humano e de rato; a reatividade com outras espécies deve ser testada individualmente.

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