Anticorpo Policlonal de Coelho BRD4 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60885

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BRD4

• O BRD4 é uma proteína contendo domínio bromo que funciona como um leitor de cromatina, reconhecendo e ligando-se especificamente a histonas acetiladas para transmitir a memória epigenética através das divisões celulares e manter a estrutura de alta ordem da cromatina. Referências relacionadas: PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504 PMID:22334664 PMID:23589332

• Desempenha um papel crítico na regulação da transcrição ao associar-se ao complexo P-TEFb e recrutá-lo para os promotores de genes indutíveis por sinal, promovendo assim o alongamento da RNA polimerase II. Referências relacionadas: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240

• O BRD4 também atinge enhancers distais, onde colabora com a JMJD6 para formar um complexo P-TEFb ativo ao deslocar reguladores negativos como HEXIM1 e o snRNA 7SK. Referências relacionadas: PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240

• A proteína medeia direta ou indiretamente a fosforilação do domínio C-terminal (CTD) da RNA polimerase II na serina-2, uma etapa chave no alongamento da transcrição. Referências relacionadas: PMID:23086925 PMID:22509028

• Além das histonas, o BRD4 reconhece a RELA acetilada, facilitando a ativação transcricional mediada por NF-kappa-B. Referências relacionadas: PMID:19103749

• O BRD4 também é recrutado para os promotores alvo de p53/TP53 após a fosforilação por CK2, atuando como um regulador da transcrição dependente de p53. Referências relacionadas: PMID:23317504

• Na resposta a danos no DNA, o BRD4 atua como um isolador de cromatina ao recrutar o complexo condensina-2 para histonas acetiladas, limitando assim a propagação da fosforilação de H2AX.

• Subcelularmente, o BRD4 localiza-se no núcleo e na cromatina; é expresso de forma onipresente nos tecidos, refletindo seu papel fundamental na biologia da cromatina e na transcrição.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 700-794 do BRD4 humano) visa uma região fora dos domínios bromo conservados, potencialmente oferecendo especificidade para o BRD4 sobre outros membros da família BET; no entanto, a reatividade cruzada deve ser confirmada no sistema experimental relevante.
• Para aplicações de Western blot, uma banda esperada em torno de 152 kDa deve ser detectada; otimize a diluição do anticorpo e os tempos de exposição para obter resultados claros.
• Em imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), é esperada a coloração nuclear do BRD4; certifique-se de métodos adequados de fixação e recuperação de antígeno para preservar a acessibilidade do epítopo.
• Ao usar este anticorpo em ELISA, considere usar o peptídeo imunógeno como controle positivo e valide o desempenho em diferentes tipos de amostras.

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