Anticorpo mAb de Coelho Calmegin para WB, IF-P, ELISA - O14967

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Antecedentes Biológicos: Função e Localização do Calmegin

• O Calmegin (CLGN) é uma chaperona molecular específica dos testículos que pertence à família da calreticulina/calnexina de proteínas do retículo endoplasmático (RE).
• Funciona durante a espermatogénese auxiliando o dobramento e o controlo de qualidade das proteínas clientes essenciais para a interação espermatozoide-ócito, incluindo a adesão e penetração da zona pelúcida.
• O Calmegin é necessário para a migração normal dos espermatozoides do útero para a trompa de Falópio e para a fertilidade masculina (por similaridade).
• A proteína liga iões de cálcio, uma característica crítica para a sua atividade de chaperona e estabilidade estrutural.
• O Calmegin localiza-se na membrana do retículo endoplasmático, onde medeia o dobramento de proteínas através do seu domínio tipo lectina.
• As modificações pós-traducionais do Calmegin incluem acetilação, fosforilação e formação de pontes dissulfeto, que podem regular a sua função e interações.
• O splicing alternativo gera múltiplas variantes de transcrição, potencialmente produzindo isoformas com propriedades funcionais distintas.
• De acordo com o seu papel na reprodução, a expressão do Calmegin é predominantemente detetada nos testículos ao nível proteico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 70 kDa; use lisados proteicos derivados de testículos como controlo positivo, uma vez que a expressão do Calmegin está restrita a este tecido.
• Ao realizar imunofluorescência (IF-P), inclua passos de permeabilização para permitir o acesso do anticorpo ao Calmegin localizado na membrana do RE; valide a coloração em secções de testículos ou modelos celulares que expressem Calmegin endógeno ou recombinante.
• O imunogénio abrange o domínio luminal (aa 180–350), sugerindo adequação para detetar formas nativas e desnaturadas; considere a acessibilidade do epítopo em diferentes condições de ensaio.
• A reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato é relatada; verifique a homologia da sequência e teste em amostras de testículos das espécies apropriadas se for usado em modelos não humanos.
• Para aplicações de ELISA, otimize as condições de revestimento e as concentrações de anticorpo usando proteína recombinante de Calmegin ou fragmentos de péptidos.

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