Anticorpo Policlonal de Coelho CD146/MCAM para WB & ELISA - P43121

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD146/MCAM

• O CD146, também conhecido como MCAM, MUC18 e MelCAM, é uma glicoproteína de superfície celular codificada pelo gene MCAM em humanos.
• Funciona como uma molécula de adesão envolvida na coesão da monocamada endotelial nas junções intercelulares, desempenhando um papel crítico na integridade do tecido vascular.
• A expressão de CD146 em células de melanoma facilita a interação com elementos vasculares, promovendo a disseminação hematogênica do tumor e metástase.
• Durante o desenvolvimento embrionário, o CD146 pode atuar como uma molécula de adesão em células da crista neural, apoiando sua migração.
• Como receptor, o CD146 desencadeia a fosforilação de tirosina das quinases FYN e FAK1 e induz um aumento transitório na concentração intracelular de cálcio.
• A proteína está localizada na membrana e é detectada predominantemente em células endoteliais e músculo liso vascular em tecidos adultos normais, com expressão regulada positivamente associada à progressão do melanoma maligno.
• O CD146 contém domínios extracelulares semelhantes a imunoglobulinas, uma hélice transmembrana e uma cauda citoplasmática, e sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação, fosforilação e formação de ligações dissulfeto.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 447-646, que se encontram na região extracelular do CD146; esta região é conservada em humanos e ratos, suportando a reatividade cruzada observada.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em aproximadamente 72 kDa (peso molecular previsto ~71,6 kDa), embora a glicosilação possa causar pequenos deslocamentos; valide a banda com controles positivos apropriados, como lisados de células endoteliais ou de melanoma.
• Em aplicações de ELISA, pode ser usado o revestimento direto de CD146 recombinante ou lisados celulares; faça a titulação do anticorpo e inclua reagentes de detecção secundária apropriados.
• Como um anticorpo policlonal, a variação de lote para lote é possível; considere incluir um controle positivo conhecido ou uma curva padrão em cada experimento para garantir a reprodutibilidade.

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