mAb de coelho anti-CD43 para WB, IF/ICC, ELISA - P16150

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da CD43

• A leucosialina (CD43, SPN) é a principal sialoproteína da superfície celular dos leucócitos, fortemente glicosilada e expressa em múltiplas isoformas.
• Regula a ativação e a diferenciação das células T: regula negativamente a diferenciação Th2 e promove a expressão de IFN-gama pelas células T, induzindo a expressão dos receptores de citocinas IFNGR e IL4R e mediando seu agrupamento com o TCR (PubMed:18036228; PubMed:24328034). Referências relacionadas: PMID:18036228 PMID:24328034
• Atua como um importante ligante da E-selectina, responsável pelo rolamento das células Th17 sobre a vasculatura ativada e pelo seu recrutamento durante a inflamação, mediando a adesão específica das células Th17 à E-selectina (por similaridade).
• Protege as células contra sinais apoptóticos, promovendo a sobrevivência celular.
• Localiza-se na membrana plasmática, nas microvilosidades e no uropódio, sendo também encontrada no núcleo e nos corpos de PML.
• É expressa especificamente na superfície celular de timócitos, linfócitos T, neutrófilos, plasmócitos e mielomas.
• Sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação, fosforilação e conjugação com ubiquitina, conforme refletido por seu maior peso molecular aparente na SDS-PAGE.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para western blot, considere utilizar lisados de células inteiras de linhagens celulares de leucócitos humanos (por exemplo, Jurkat), dado o peso previsto de 40 kDa; verifique o padrão das bandas devido à intensa glicosilação e à variação entre isoformas.
• Na IF/ICC, permeabilize as células para detectar tanto os reservatórios de membrana quanto os potenciais reservatórios nucleares; faça co-coloração com marcadores de organelas para validar a localização.
• Para ELISA, avalie a reatividade contra a proteína CD43 recombinante ou contra um peptídeo que abranja a região do imunógeno, a fim de confirmar a especificidade no seu sistema de ensaio.
• Valide o desempenho do anticorpo no sistema de amostras e na aplicação relevantes; por ser um anticorpo monoclonal de coelho, espera-se alta especificidade, mas faça sempre a titulação e inclua controles positivos e negativos.

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