Anticorpo Policloonal de Coelho CDK4 [KO Validado] para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P11802

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CDK4

• Cinase dependente de ciclina 4 (CDK4) é uma proteína quinase Ser/Thr que forma complexos ativos com ciclinas do tipo D, regulando principalmente a transição G1/S do ciclo celular.
• A CDK4 fosforila a proteína retinoblastoma (RB1), levando a dissociação e ativação dos fatores de transcrição E2F, que promovem a expressão de genes necessários para entrada na fase S.
• Ela hipofosforila RB1 no início da fase G1 e funciona como um principal integrador das vias de sinalização mitogênicas e antimitogênicas.
• Além disso, a CDK4 fosforila SMAD3 de maneira dependente do ciclo celular, reprimindo sua atividade transcripcional.
• A translocação nuclear e atividade completa do complexo ciclina D-CDK4 requer montagem em um complexo ternário com CDKN1B (p27Kip1).
• A localização subcelular inclui citoplasma, núcleo e membrana nuclear.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação; o splicing alternativo produz isoformas distintas.
• A CDK4 está envolvida em diversas doenças através de variantes de ganho de função e é um componente do proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi projetado a partir de um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 204-303 da CDK4 humana. Essa região está localizada dentro do domínio C-terminal e pode contribuir para a especificidade do anticorpo.
• Para Western blotting (WB), considere usar lisados de células totais de linhas celulares proliferantes humanas, de camundongo ou rato. A CDK4 endógena migra em ~34 kDa; o anticorpo detecta a proteína de comprimento total.
• Na imunohistoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), podem ser necessárias etapas de recuperação de antígeno e permeabilização. Sempre valide o padrão de coloração em um sistema de tecido ou celular relevante.
• O anticorpo é adequado para imunoprecipitação (IP) e ELISA como indicado; os usuários devem otimizar as condições e confirmar os resultados através de controles paralelos.

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