Anticorpo Policlonal de Coelho CDK5RAP3 para WB e ELISA - Q96JB5

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CDK5RAP3

• A proteína 3 associada à subunidade reguladora do CDK5 (CDK5RAP3), também conhecida como C53, IC53, LZAP, HSF-27, MST016, PP1553 ou OK/SW-cl.114, é uma proteína adaptadora multifuncional codificada pelo gene CDK5RAP3.
• Atua como um adaptador de substrato de complexos de ligase E3 que medeiam a ufmylação, a ligação covalente do modificador semelhante à ubiquitina UFM1 às proteínas alvo, e está envolvida em processos críticos como a reciclagem de ribossomos e reticulofagia (ER-fagia).
  Referências relacionadas: PMID:23152784, PMID:30635284, PMID:32851973, PMID:37595036
• Dentro do complexo UREL associado ao ribossomo, o CDK5RAP3 promove a mono-ufmylação da proteína ribossomal 60S RPL26/uL24 em Lys-134, enfraquecendo a interação entre as subunidades 60S pós-terminação e os translocons SEC61, facilitando assim a liberação e reciclagem das grandes subunidades ribossomais da membrana do retículo endoplasmático.
  Referências relacionadas: PMID:38383785, PMID:38383789, PMID:36121123
• O CDK5RAP3 também funciona na regulação transcricional, controlando negativamente a transcrição gênica mediada por NF-kappa-B através da modulação da fosforilação de RELA, e desempenha um papel na transição mitótica G2/M e nos pontos de verificação de danos ao DNA.
  Referências relacionadas: PMID:17785205, PMID:20228063, PMID:15790566, PMID:19223857
• Através da interação com CDKN2A/ARF e MDM2, o CDK5RAP3 pode induzir a ubiquitinação, estabilização e ativação de p53/TP53, promovendo assim a prisão do ciclo celular G1 e inibindo a proliferação celular.
  Referências relacionadas: PMID:16173922
• A proteína localiza-se na membrana do retículo endoplasmático, citoplasma, núcleo e centríolo/citoesqueleto, e é expressa ubiquamente em tecidos, incluindo coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, músculo esquelético, rim e pâncreas; a isoforma 3 mostra expressão no rim, fígado, músculo esquelético e placenta.
  Referências relacionadas: PMID:10721722, PMID:12054757, PMID:12737517
• Funções adicionais incluem potencial envolvimento na ruptura do envelope nuclear durante a apoptose e regulação da atividade de MAPK14 através da modulação de sua desfosforilação por PPM1D/WIP1.
  Referências relacionadas: PMID:23478299, PMID:21283629
• No contexto de infecção microbiana, o CDK5RAP3 pode ser regulado negativamente por uma forma mutante da grande proteína de envelope do vírus da hepatite B (pre-s2) para promover a entrada mitótica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para western blotting, o anticorpo pode detectar uma banda em torno de 57 kDa correspondente ao CDK5RAP3 de comprimento total; o uso de lisados de controle positivo humanos apropriados (por exemplo, de linhagens celulares ou tecidos conhecidos por expressarem CDK5RAP3) e controles negativos é aconselhável para confirmar a especificidade.
• Como um anticorpo policlonal produzido contra a região N-terminal de aminoácidos 1-300 do CDK5RAP3 humano, a reatividade cruzada com variantes de splicing ou parálogos que contenham esta região não pode ser excluída; a validação no sistema experimental relevante é recomendada.
• O anticorpo é recomendado para WB e ELISA de acordo com a lista de aplicações do fabricante; para outras técnicas, como IHC ou IF, a viabilidade e as condições ideais de trabalho devem ser determinadas empiricamente.
• Dado o envolvimento do CDK5RAP3 na ufmylação e regulação do ciclo celular, considere análises complexas ou experimentos de co-imunoprecipitação com parceiros de ligação relevantes se o foco da pesquisa se estender a essas vias.
• Armazene o anticorpo conforme recomendado upon receipt (enviado em sacos de gelo); ciclos repetidos de congelamento-descongelamento devem ser evitados para manter o desempenho.

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