Anticorpo policlonal de coelho contra CDK9 para WB e ELISA - P50750

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da CDK9

• A CDK9 é uma serina/treonina-proteína quinase que forma a subunidade catalítica do complexo do fator b de elongação positiva da transcrição (P-TEFb) com a ciclina T. Esse complexo é essencial para a elongação da transcrição pela RNA-polimerase II. Referências relacionadas: PMID:10574912, PMID:10757782, PMID:11145967

• O P-TEFb fosforila o domínio C-terminal da RNA-polimerase II (POLR2A), bem como os fatores de elongação negativos DSIF e NELF, aliviando seus efeitos inibitórios sobre a transcrição. Ele também fosforila fatores de transcrição como EP300, MYOD1 e AR. Referências relacionadas: PMID:10912001, PMID:11112772, PMID:12037670

• A CDK9 modula uma complexa rede de modificações da cromatina, incluindo a monoubiquitinação da histona H2B (H2Bub1), a trimetilação de H3K4 (H3K4me3) e H3K36me3, integrando a transcrição ao processamento cotranscricional do mRNA de histonas. Referências relacionadas: PMID:15564463, PMID:19575011, PMID:19844166

• A CDK9 fosforila a histona H1.4 em Ser-187, uma marca associada à ativação transcricional. Referência relacionada: PMID:28539972

• A quinase desempenha um papel na resposta ao estresse replicativo e na manutenção da integridade do genoma por meio do complexo CDK9/ciclina-K, promovendo a recuperação do ciclo celular após a interrupção da replicação e limitando os danos ao DNA. Referência relacionada: PMID:20493174

• Subcelularmente, a CDK9 é encontrada no núcleo, nos corpos de PML e no citoplasma, sendo expressa ubiquamente nos tecidos humanos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 153-372 da CDK9 humana, uma região conservada entre humanos, camundongos e ratos, o que sustenta a reatividade cruzada relatada. Considere verificar o desempenho em sistemas de amostras específicos de cada espécie.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 43 kDa. Utilize lisados de controle positivo adequados (por exemplo, HeLa e Jurkat) e valide a especificidade da banda com controles de knockdown ou peptídeos bloqueadores.
• Para ELISA, o anticorpo pode detectar tanto a CDK9 nativa quanto a recombinante. Otimize a concentração do antígeno de revestimento e realize experimentos de titulação para estabelecer as diluições de trabalho.
• Considere o padrão de expressão ubíqua da CDK9 ao selecionar controles negativos e interpretar os resultados.

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