Anticorpo monoclonal de coelho anti-Citrulina-Histona H3 (Citrulinação R8) (Q16695/P68431) para WB, DB, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, responsável por envolver e compactar o DNA na cromatina. Este papel estrutural é fundamental para regular a acessibilidade do DNA e, assim, controlar processos essenciais como transcrição, reparo de DNA, replicação e estabilidade cromossômica. As histonas, incluindo a H3, estão sujeitas a uma complexa gama de modificações pós-traducionais — frequentemente chamadas de “código de histonas” — que modulam dinamicamente a estrutura da cromatina e a expressão gênica.

Este anticorpo detecta especificamente a citrulinação na arginina 8 (R8) da Histona H3. A citrulinação, a conversão de arginina em citrulina, é mediada por peptidilarginina deiminases (PADs) e tem sido implicada na regulação gênica, NETose e doenças autoimunes. Sabe-se que a Histona H3 é citrulinada em múltiplos resíduos, incluindo R3, R8, R17 e R26, e essas modificações podem influenciar a compactação da cromatina. Referências relacionadas: PMID:16567635.

As duas acessões SWISS-PROT cobertas por este anticorpo, Q16695 (Histona H3.1t) e P68431 (Histona H3.1), representam variantes de histonas distintas. A Q16695 é uma variante da H3 específica dos testículos, expressa em células testiculares, enquanto a P68431 corresponde à Histona H3.1 canônica dependente de replicação, que é expressa ubiquamente. Ambas localizam-se no núcleo e no cromossomo.

A Histona H3 é extensivamente modificada em sua cauda N-terminal, incluindo acetilação, metilação, fosforilação, citrulinação e muitas outras marcas. Essas modificações são reguladas dinamicamente e servem como plataformas de ligação para complexos modificadores de cromatina, governando assim a identidade celular e a resposta a sinais ambientais.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), considere usar 10–20 µg de lisado de célula total por canaleta. Valide o anticorpo no sistema de amostra relevante (por exemplo, células estimuladas com citrulinação induzida) e inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Para dot blot (DB) e ELISA, otimize a concentração de revestimento do antígeno e as condições do tampão para garantir a detecção específica da Histona H3 citrulinada. Um peptídeo citrulinado sintético ao redor da R8 pode servir como controle positivo.
• Como a citrulinação pode ser transitória e dependente de enzimas, a preparação da amostra deve preservar as modificações pós-traducionais; considere usar inibidores de PAD ou lise imediata com inibidores de fosfatase/protease apropriados.
• Este anticorpo monoclonal de coelho pode ser usado para investigar a dinâmica da citrulinação em vários tipos de amostras humanas; a reatividade cruzada com outras espécies tem uma ampla gama prevista, mas os usuários finais devem verificar em seus modelos experimentais específicos.

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