mAb de Coelho contra Caspase-7 Clivada para WB, ELISA - P55210

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Caspase-7

• A Caspase-7 é uma tiolprotease que participa de vários processos de morte celular programada, incluindo apoptose, piroptose e morte mediada por granzima, através da clivagem proteolítica de proteínas alvo. Ela é produzida como um zimogênio inativo e requer clivagem proteolítica para ativação. Referências relacionadas: PMID:11257230 PMID:11257231 PMID:11701129

• Ela apresenta uma forte preferência por clivagem após sequências consenso Asp-Glu-Val-Asp (DEVD), com alguma flexibilidade para sequências alternativas não canônicas. Referências relacionadas: PMID:12824163 PMID:15314233 PMID:17697120

• Como uma caspase efetora na fase de execução da apoptose, ela cliva substratos chave incluindo CLSPN, PARP1, PTGES3 e YY1. Ela é considerada uma executora menor em comparação com a CASP3 e cliva um conjunto mais limitado de alvos. Referências relacionadas: PMID:10497198 PMID:16123041 PMID:16374543 PMID:18723680

• Ela funciona como um regulador chave da resposta inflamatória ao clivar e ativar a esfingomielina fosfodiesterase SMPD1 no meio extracelular, promovendo assim o reparo da membrana durante infecção bacteriana. Também regula a piroptose em células epiteliais intestinais e a morte celular programada mediada por granzima em hepatócitos. Referências relacionadas: PMID:21157428

• Após clivagem pela CASP1 em resposta à ativação do inflamassoma, a caspase-7 processa e inativa a PARP1, aliviando a atividade repressora da transcrição da PARP1. Referências relacionadas: PMID:22464733

• Ela cliva e ativa proteínas de ligação a elementos reguladores de esterol (SREBPs), ligando a apoptose ao metabolismo lipídico. Referências relacionadas: PMID:8643593

• Subcelularmente, a caspase-7 encontra-se predominantemente no citosol e no núcleo, podendo também ser secretada para o espaço extracelular.

• Expressão tecidual: altamente expressa em pulmão, músculo esquelético, fígado, rim, baço e coração; moderadamente em testículo; e ausente no cérebro.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para análise por Western blot, recomendamos o uso de lisados celulares tratados com indutores de apoptose (por exemplo, estaurosporina ou TNF-α/cicloheximida) para gerar a forma ativa clivada da caspase-7. A forma pró-enzima tem um peso molecular previsto de 34 kDa, enquanto os fragmentos clivados (p20 e p11) migram com pesos moleculares menores. Valide em sua linha celular específica e condições de tratamento.

• Este anticorpo é validado para ELISA e pode ser usado como anticorpo de captura ou detecção em formatos de ELISA sanduíche para quantificar níveis de caspase-7 clivada em lisados celulares ou sobrenadantes de cultura. Aconselha-se a otimização da concentração de revestimento e da diluição da amostra.

• A reatividade cruzada está confirmada para amostras humanas; a reatividade com outras espécies não foi testada. Se trabalhar com modelos não humanos, considere realizar o alinhamento de sequências e a validação experimental.

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