Anticorpo Policlonal de Coelho para PARP1 clivado p25 para WB e ELISA - P09874

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PARP1 clivada p25

• A PARP1 (Poly [ADP-ribose] polymerase 1) é uma enzima nuclear que medeia a poli-ADP-ribosilação (PARylation) de proteínas alvo, desempenhando um papel central no reparo de danos ao DNA ao reconhecer quebras de fita e recrutar a maquinaria de reparo. Referências relacionadas: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Após a clivagem pela caspase-3/7 durante a apoptose, a PARP1 é clivada em um fragmento N-terminal de 25 kDa (p25) e um fragmento C-terminal de 89 kDa; o fragmento p25 promove a apoptose mediada por AIFM1 e se liga irreversivelmente às quebras de DNA, interferindo no reparo do DNA e aumentando a morte celular. Referências relacionadas: PMID:33168626
• A PARP1 está principalmente localizada no núcleo, nucléolo e cromossomos, mas pode se translocar para o citoplasma durante a apoptose; contém múltiplos domínios de dedo de zinco para ligação ao DNA e um domínio de auto-poli-ADP-ribosilação.
• Como enzima chave do reparo de DNA, a PARP1 catalisa a ADP-ribosilação de serina, glutamato e outros aminoácidos em histonas e proteínas de reparo, facilitando o relaxamento da cromatina e o recrutamento de fatores de reparo. Referências relacionadas: PMID:19764761, PMID:25043379, PMID:28190768, PMID:33186521, PMID:34874266
• A PARP1 também atua na regulação da transcrição, funcionando tanto como repressor (por meio da modulação da estrutura da cromatina) quanto como regulador positivo/negativo do alongamento da transcrição, além de estar envolvida na progressão da forquilha de replicação. Referências relacionadas: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539, PMID:33412112
• A PARP1 está implicada na imunidade inata, regulando negativamente a via cGAS-STING por meio da PARylation citosólica do cGAS. Referências relacionadas: PMID:32315358, PMID:32844745, PMID:35460603
• As modificações pós-traducionais da PARP1 incluem acetilação, fosforilação, ubiquitinação e extensa auto-poli-ADP-ribosilação, que regulam sua atividade e interações.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo corresponde à região N-terminal (aminoácidos 201–300) do fragmento p25 da PARP1 clivada humana. No WB, certifique-se de que a preparação da amostra seja feita em condições apoptóticas para gerar o produto de clivagem p25; considere usar controles positivos, como células tratadas com estaurosporina.
• Para ELISA, este anticorpo pode ser usado como anticorpo de captura ou detecção para medir especificamente os níveis de PARP1 clivada; valide a sensibilidade e especificidade da detecção com proteína p25 recombinante ou ensaios de competição com peptídeos.
• A reatividade cruzada é relatada para humanos; teste em outras espécies, se necessário, pois a homologia de sequência pode variar.

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