Anticorpo policlonal de coelho para Complemento C3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P01024

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Complemento C3

• O Complemento C3 é o precursor de componentes não enzimáticos essenciais para todas as vias do complemento (clássica, alternativa, lectina, GZMK), iniciando uma cascata que culmina na fagocitose, degradação de patógenos e sinalização imunológica adaptativa. Referências relacionadas: PMID:28264884 PMID:31507604 PMID:3653927 PMID:6903192
• Após a clivagem pela C3 convertase, o C3b é gerado; ele se liga covalentemente às superfícies dos patógenos por meio de sua ligação tioéster reativa, atua como opsonina e colabora com o C4b para recrutar C2b (vias clássica/lectina) ou CFB (via alternativa) para montar a C5 convertase. Referências relacionadas: PMID:28264884 PMID:31507604 PMID:3653927 PMID:12878586 PMID:18204047 PMID:2387864 PMID:624565 PMID:6554279
• O fragmento C3a atua como uma anafilatoxina potente, ligando-se ao C3AR1 para desencadear sinalização acoplada à proteína G, levando à fosforilação e internalização do receptor, e estimulando mastócitos e basófilos a liberar citocinas, quimiocinas e histamina, promovendo assim a inflamação local. Referências relacionadas: PMID:6968751 PMID:37169960 PMID:37852260 PMID:8702752 PMID:23383423
• O C3a também atua como quimioatraente, direcionando a migração de macrófagos e neutrófilos para os tecidos inflamados para facilitar a neutralização dos gatilhos por meio da fagocitose e das espécies reativas de oxigênio. Referências relacionadas: PMID:23383423 PMID:342601 PMID:5778786
• Além de suas funções imunológicas, o C3 atua como um hormônio adipogênico (proteína estimuladora da acilação), ligando-se ao C5AR2 e ativando as vias PLC, MAPK e AKT para estimular a síntese de triglicerídeos e o transporte de glicose nos adipócitos, regulando assim o armazenamento de gordura e a depuração lipídica pós-prandial. Referências relacionadas: PMID:10432298 PMID:15833747 PMID:16333141 PMID:11773063 PMID:12540846 PMID:19615750
• O Complemento C3 é secretado no plasma e também pode se localizar na superfície celular; é produzido em abundância por hepatócitos e adipócitos, com níveis plasmáticos detectáveis tanto no estado de jejum quanto pós-prandial.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais significativas, incluindo formação de pontes dissulfeto, glicosilação, fosforilação e uma ligação tioéster crítica; mutações estão implicadas na degeneração macular relacionada à idade e na síndrome hemolítica urêmica atípica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 1364-1663) do Complemento C3 humano, que abrange parte do fragmento C3b e o domínio do tioéster. Esta região é altamente conservada entre as espécies, o que é consistente com a reatividade cruzada observada com camundongo e rato.
• Para Western blotting, recomenda-se o uso de condições redutoras e desnaturantes para resolver completamente a proteína de 187 kDa. A presença de múltiplas pontes dissulfeto pode causar alargamento das bandas ou oligomerização em condições não redutoras.
• Para imunohistoquímica (IHC), otimize os protocolos de recuperação de antígeno e fixação para o seu tipo de tecido. Amostras de fígado e tecido adiposo são recomendadas como controle positivo devido à alta expressão de C3.
• O anticorpo também é adequado para imunofluorescência e ELISA; os bloqueadores e tampões de incubação apropriados devem ser determinados empiricamente.
• Como anticorpo policlonal, ele reconhece múltiplos epitopos no imunógeno, potencializando o sinal em aplicações desnaturantes. Valide o desempenho no seu contexto experimental específico.

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