Anticorpo Monoclonal de Camundongo contra CYP7A1 para WB e ELISA - P22680

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CYP7A1

• O citocromo P450 7A1 (CYP7A1), também conhecido como colesterol 7-alfa-mono-oxigenase ou CYP7, é uma enzima hepática essencial que inicia a via clássica da biossíntese de ácidos biliares.
• Catalisa a 7-alfa-hidroxilação do colesterol, a etapa limitante da velocidade na conversão do colesterol em ácidos biliares primários, regulando assim a homeostase do colesterol. Referências relacionadas: PMID:12077124, PMID:19965590, PMID:2384150
• Também hidroxila oxiesteróis, como o 4beta-hidroxicolesterol e o 24-hidroxicolesterol, contribuindo para a síntese alternativa de ácidos biliares e o metabolismo de oxiesteróis. Referências relacionadas: PMID:11013305, PMID:12077124
• Funciona como uma mono-oxigenase que utiliza oxigênio molecular e NADPH por meio da redutase do citocromo P450 para incorporar um átomo de oxigênio ao substrato, enquanto reduz o segundo átomo a água. Referências relacionadas: PMID:11013305, PMID:12077124, PMID:19965590
• Oxida a ligação dupla 7,8 do 7-desidrocolesterol e do latosterol, gerando predominantemente derivados 7-ceto e ampliando seu papel no metabolismo dos esteróis. Referências relacionadas: PMID:21813643
• Está localizada na membrana do retículo endoplasmático e na membrana dos microssomos, em conformidade com sua função como citocromo P450 ligado à membrana.
• Contém um cofator de ferro heme necessário para sua atividade catalítica e é caracterizada por uma dobra estrutural P450 conservada.
• É expressa principalmente no fígado, conforme demonstrado por análises específicas de tecidos, de acordo com seu papel no catabolismo hepático do colesterol.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região N-terminal (aa 86-108) que pode ser conservada entre as espécies, em concordância com a reatividade cruzada observada com a CYP7A1 de camundongo e rato.
• Para Western blot, espera-se uma banda específica de aproximadamente 58 kDa. Valide com controles positivos e negativos apropriados, como lisados de fígado humano.
• As aplicações em ELISA podem se beneficiar do uso da proteína CYP7A1 recombinante como padrão quantitativo; as condições do ensaio devem ser otimizadas empiricamente.
• Como a expressão da CYP7A1 é específica do fígado, a preparação das amostras deve considerar a origem do tecido; recomenda-se o uso de extratos de fígado como controle positivo.

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