Anticorpo Monoclonal de Coelho Cytochrome c - P99999

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Cytochrome c

• O Cytochrome c é uma pequena proteína heme (peso molecular ~11,7–12 kDa) codificada pelo gene CYCS em humanos. É um transportador de elétrons bem conservado, essencial para a função mitocondrial e apoptose.
• Como componente da cadeia de transporte de elétrons, o Cytochrome c transporta elétrons entre o Complexo III (citocromo c redutase) e o Complexo IV (citocromo c oxidase) dentro do espaço intermembranar mitocondrial.
• Além de seu papel respiratório, o Cytochrome c é um mediador crítico da apoptose. A liberação do Cytochrome c das mitocôndrias para o citosol desencadeia a montagem do apoptossomo, ativando a caspase-9 e iniciando a cascata de caspases que leva à morte celular.
• A proteína localiza-se principalmente no espaço intermembranar mitocondrial sob condições fisiológicas normais. Após estímulos apoptóticos, ela é liberada para o citoplasma através de mecanismos envolvendo proteínas da família Bcl-2 e permeabilização da membrana mitocondrial externa.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, regulam a conformação e função do Cytochrome c, influenciando tanto a eficiência do transporte de elétrons quanto sua atividade pró-apoptótica.
• Palavras-chave associadas ao Cytochrome c incluem: Estrutura-3D, apoptose, transporte de elétrons, heme, ferro, ligação a metal, mitocôndria, fosfoproteína e cadeia respiratória.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende a proteína Cytochrome c madura de comprimento total (aminoácidos 1–105), que deve suportar o reconhecimento da conformação nativa em múltiplas espécies devido à alta conservação da sequência.
• Para Western blot (WB), considere tanto condições redutoras quanto não redutoras, pois a liberação da proteína das mitocôndrias e a ligação do heme podem afetar a migração; valide o anticorpo em lisados celulares relevantes (por exemplo, frações citosólicas vs. mitocondriais).
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor) e diluição otimizada do anticorpo são recomendados para tecidos fixados em formol e incluídos em parafina para detectar a localização mitocondrial ou citosólica do Cytochrome c.
• Para ELISA, o emparelhamento deste anticorpo monoclonal com um segundo anticorpo direcionado a um epítopo distinto pode permitir a detecção por ELISA sanduíche; valide o par em amostras adicionadas ("spiked") ou matrizes biológicas relevantes para a pesquisa de apoptose.

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