mAb de coelho anti-DDX1 para WB, IHC-P, IP, ELISA - Q92499

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do DDX1

• Helicase de RNA dependente de ATP capaz de desenrolar dúplex de RNA-RNA e RNA-DNA; possui atividade ATPase sobre RNA.
• Atua como coativador com RELA para aumentar a transcrição mediada por NF-kappa-B; liga-se ao promotor da ciclina CCND2.
• Liga-se ao RNA poli(A) e pode estar envolvido no processamento da extremidade 3' e na poliadenilação do mRNA.
• Subunidade acessória do complexo ligase de splicing de tRNA, unindo diretamente as metades de tRNA submetidas a splicing; coopera com a archease para a guanililação do RTCB. Referências relacionadas: PMID:24870230
• Localiza-se subcelularmente no núcleo, citoplasma, grânulos citoplasmáticos, citosol e mitocôndria.
• Maior expressão em tecidos de origem neuroectodérmica (retina, cérebro, medula espinhal) e em linhagens celulares de retinoblastoma.
• Componente de um sensor citoplasmático de dsRNA viral, desencadeando respostas imunes inatas antivirais por meio de TICAM1.
• Necessário para a replicação do HIV-1 e do coronavírus IBV; liga-se à sequência de mRNA RRE do HIV-1.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 441–740 no domínio helicase C-terminal, que é conservado entre humano, camundongo e rato, sustentando a reatividade cruzada observada.
• Para Western blot, espera-se uma banda próxima de 82 kDa; considere usar lisados de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato como controles positivos.
• As aplicações de IHC-P podem exigir a otimização da recuperação antigênica; recomenda-se o uso de cortes de tecido de retinoblastoma ou cérebro para validação.
• Na imunoprecipitação, devido às múltiplas localizações subcelulares do DDX1, a composição do tampão de lise e a concentração de sal podem precisar de ajustes.
• O desempenho no ELISA deve ser verificado com proteína DDX1 recombinante ou por detecção endógena em extratos celulares.

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