Anticorpo Monoclonal de Coelho DiMethyl-Histone H3-K36 (Q16695/P68431) para WB, IHC, IP & ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• Componente central do nucleossomo: A Histona H3 é essencial para o enrolamento e compactação do DNA em cromatina, o que restringe o acesso ao DNA para transcrição, reparo e replicação. Este papel central influencia a regulação da transcrição, o reparo do DNA, a replicação do DNA e a estabilidade cromossômica.
  Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Localização subcelular: A Histona H3 localiza-se no núcleo e é um componente estrutural dos cromossomos, formando a partícula central do nucleossomo.
  Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Especificidade tecidual: A Histona canônica H3.1 (P68431) é expressa de forma onipresente, enquanto a variante Histona H3.1t (Q16695) é específica do testículo.
  Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Modificações pós-traducionais (PTMs): A Histona H3 sofre extensas PTMs, incluindo metilação, acetilação, fosforilação, citrulinização e ubiquitinação. Essas modificações formam o "código de histonas" que regula a estrutura da cromatina e a expressão gênica. A dimetilação na lisina 36 (H3K36me2, correspondente à posição 37 do UniProt) está associada ao alongamento transcricional e é catalisada por metiltransferases como NSD1.
  Referências relacionadas: PMID:15983376

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda em ~15 kDa. Considere o uso de lisatos enriquecidos no núcleo para detecção ideal e valide o protocolo de lise para o seu tipo de amostra.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), teste as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato pH 6,0 ou EDTA pH 9,0) e otimize a diluição do anticorpo para o seu tecido e método de fixação.
• Para aplicações de dot blot (DB) e ELISA, o anticorpo pode ser usado para detectar ou quantificar peptídeos H3K36 dimetilados; inclua controles de peptídeo apropriados (não modificados e outros peptídeos de estado de metilação) para verificar a especificidade.
• Ao usar imunofluorescência (IF/ICC), as condições de permeabilização e a fixação podem afetar a acessibilidade do epítopo; considere testar a fixação com metanol versus formaldeído.
• Na imunoprecipitação (IP), use reticulação ou condições nativas, dependendo do complexo alvo; valide a rigorosidade das lavagens para preservar a interação anticorpo-antígeno.
• O anticorpo tem reação cruzada prevista com uma ampla gama de espécies; é aconselhável confirmar a especificidade no seu sistema experimental, particularmente para amostras não mamíferas.

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