Anticorpo monoclonal de coelho DiMethyl-Histona H3-K4 (Q16695/P68431) para ChIP, WB e pesquisa epigenética

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3 (Dimetil-K4)

• A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, a unidade básica da cromatina. Juntamente com as histonas H2A, H2B e H4, ela empacota o DNA, regulando o acesso para transcrição, replicação, reparo e estabilidade cromossômica.
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• A Histona H3 se localiza no núcleo e nos cromossomos.
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• Existem múltiplas variantes da histona H3. A variante H3.1 dependente de replicação (por exemplo, codificada pelos genes H3C1–H3C12) é amplamente expressa, enquanto a variante H3.1t (H3-4/HIST3H3) apresenta expressão específica do testículo, indicando um papel especializado na organização da cromatina durante a espermatogênese.
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• A cauda N-terminal da histona H3 está sujeita a extensas modificações pós-traducionais (MPTs), incluindo metilação, acetilação, fosforilação, citrulinação e muito mais. Essas modificações formam um "código de histonas" que influencia a arquitetura da cromatina e a atividade genética.
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• A dimetilação na lisina 4 (H3K4me2) é uma marca epigenética bem caracterizada associada a promotores de genes ativos e em estado de prontidão, bem como a regiões de potenciadores. Este anticorpo monoclonal de coelho foi desenvolvido contra um peptídeo K4 dimetilado sintético e permite a detecção específica de H3K4me2 em vários ensaios.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Considere validar a especificidade para dimetil-K4 por meio de ensaios de competição com peptídeos ou comparando os sinais com anticorpos direcionados a outras modificações de H3.
• Para ChIP, ChIP-seq e CUT&Tag, otimize a reticulação, a fragmentação da cromatina e a quantidade de anticorpo para o seu tipo de célula ou tecido específico.
• A ampla reatividade cruzada prevista (Humano, Camundongo, Rato, Outros) sugere um epitopo conservado; mesmo assim, confirme a reatividade na sua espécie de interesse antes de estudos em larga escala.
• Use inibidores de protease e fosfatase durante a extração da amostra para preservar as modificações labilas da histona.
• O peso molecular calculado da histona H3 é de aproximadamente 15 kDa; ajuste a porcentagem do gel e as condições de transferência de acordo para o Western blotting.

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