Anticorpo Policlonal de Coelho DiMetil-Histona H3-K9 (Q16695/P68431) para Pesquisa Epigenética | WB, ChIP, IF/ICC

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, que envolve e compacta o DNA em cromatina, regulando assim a acessibilidade do DNA para processos como transcrição, reparo de DNA, replicação e estabilidade cromossômica. A modificação pós-traducional dinâmica das histonas, incluindo metilação, acetilação e fosforilação, constitui o "código das histonas" que governa a estrutura e função da cromatina.

A metilação na lisina 9 da histona H3 (H3K9; correspondente à posição 10 na entrada UniProt P68431 ao incluir a metionina iniciadora) é uma marca epigenética crítica. A dimetilação neste sítio (H3K9me2) é catalisada por várias metiltransferases e geralmente está associada à repressão transcricional e à formação de heterocromatina. Tanto a histona canônica H3.1 (P68431) quanto a variante específica de testículo H3.1t (Q16695) contêm este resíduo de lisina, que está sujeito a múltiplos tipos de modificações, incluindo di- e tri-metilação. Referências relacionadas: PMID:11242053, PMID:16185088, PMID:16267050

A histona H3 localiza-se principalmente no núcleo e é um componente estrutural dos cromossomos. Embora a H3.1 seja ubiquamente expressa em células em replicação, a H3.1t exibe especificidade tecidual e é encontrada predominantemente em células testiculares, refletindo o seu papel na organização da cromatina durante a espermatogênese. Referências relacionadas: PMID:16567635

A dobra imunoglobulina-like da histona H3, juntamente com outras histonas centrais, facilita a formação da partícula central do nucleossomo, fornecendo uma plataforma estável para a montagem de cromatina de ordem superior. Os padrões de modificação pós-traducional na H3, incluindo a dimetilação em K9, são regulados dinamicamente durante o ciclo celular e o desenvolvimento, influenciando os perfis de expressão gênica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que cobre os aminoácidos 1-100 da histona H3 humana. Ao utilizar o anticorpo em aplicações como "Western blotting" (WB) ou imuno-histoquímica (IHC), considere verificar a especificidade com ensaios de competição de peptídeos ou utilizando amostras de controle positivas e negativas bem caracterizadas.
• Para imunoprecipitação de cromatina (ChIP) e ChIP-seq, a reatividade do anticorpo com a H3K9 dimetilada (H3K9me2) pode ser explorada para mapear domínios de cromatina repressiva. Certifique-se de que as condições de reticulação e sonicação estejam otimizadas para o seu tipo celular.
• Em WB, o peso molecular esperado da histona H3 é de aproximadamente 15 kDa. Uma banda clara neste tamanho deve ser observada; bandas adicionais podem indicar ligação inespecífica, pelo que é recomendada a otimização da diluição.
• Prevê-se que este anticorpo tenha ampla reatividade cruzada com base na conservação da sequência, mas recomendamos validar a reatividade na sua espécie e tipo de amostra específicos, especialmente para organismos não mamíferos.

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