ECE1 pAb de coelho - P42892

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da ECE1

• A ECE1 é uma zinco-metaloprotease ligada à membrana que catalisa a conversão da big endotelina-1 no potente peptídeo vasoconstritor endotelina-1.
• Ela pertence à família M13 de metaloproteases e contém características estruturais que incluem uma ligação dissulfeto, sítios de glicosilação e múltiplos sítios de fosforilação.
• O splicing alternativo gera várias isoformas (A, B, C, D) que compartilham o domínio catalítico, mas diferem em suas sequências N-terminais e distribuição tecidual.
• A proteína se localiza na membrana celular por meio de uma única hélice transmembrana sinal-âncora, com o domínio catalítico voltado para o espaço extracelular/luminal.
• A ECE1 é amplamente expressa; níveis elevados são detectados em células endoteliais, placenta, pulmão, coração e glândula adrenal, com distribuições específicas de cada isoforma no fígado, rim, testículo e células musculares lisas.
• Mutações na ECE1 estão associadas à doença de Hirschsprung, um distúrbio do desenvolvimento do sistema nervoso entérico, ressaltando seu papel além da vasorregulação.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 670-770) da ECE1 humana, que inclui parte do domínio catalítico e pode reconhecer várias isoformas.
• Para Western blotting, espere uma banda de aproximadamente 87 kDa em condições redutoras; considere usar inibidores de protease recém-preparados e evitar a fervura para preservar os epítopos.
• Em IHC-P e IF/ICC, otimize os protocolos de fixação e permeabilização levando em conta a localização membranar da ECE1; a recuperação antigênica enzimática pode melhorar a detecção.
• Para ensaios ELISA, a cobertura com o imunógeno recombinante ou um peptídeo relacionado pode servir como controle positivo; recomenda-se realizar testes de pré-absorção para confirmar a especificidade.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com a ECE1 de camundongo e rato, mas seu desempenho deve ser validado no tecido ou na linhagem celular pertinente antes de estudos quantitativos.

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