mAb de coelho anti-EGFR para WB, IHC-P, ELISA - P00533

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do receptor do fator de crescimento epidérmico

• O EGFR, também conhecido como ErbB-1 ou HER1, é uma tirosina-quinase receptora que se liga a vários ligantes da família do EGF, incluindo EGF, TGF-alfa e betacelulina, para ativar a sinalização intracelular (PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029). Referências relacionadas: PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029
• Após a ligação ao ligante, o EGFR dimeriza e sofre autofosforilação, desencadeando importantes vias a jusante, como os módulos RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC e STAT (PubMed:27153536). Referências relacionadas: PMID:27153536
• O EGFR também ativa a sinalização de NF-κB e fosforila diretamente proteínas como RGS16 e MUC1 para modular a atividade das GTPases e a adesão celular (PubMed:11116146, PubMed:11602604, PubMed:11483589). Referências relacionadas: PMID:11116146 PMID:11602604 PMID:11483589
• A isoforma 2 atua como antagonista do EGF e é expressa em cânceres ovarianos, enquanto a isoforma principal é expressa ubiquamente nos tecidos.
• Subcelularmente, o EGFR localiza-se na membrana celular, no retículo endoplasmático, no complexo de Golgi, nos endossomos e no núcleo, refletindo seu tráfego dinâmico.
• O EGFR atua como receptor do hospedeiro para a entrada do vírus da hepatite C nos hepatócitos, promovendo a formação do complexo CD81-CLDN1.
• A proteína sofre várias modificações pós-traducionais, como fosforilação, ubiquitinação e palmitoilação, e está envolvida no desenvolvimento e em doenças.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 335-525 do domínio extracelular do EGFR humano, possibilitando potencialmente o reconhecimento tanto das formas ligadas à membrana quanto das formas secretadas.
• Para Western blot (WB), observe que o EGFR apresenta vários pesos moleculares relatados (44, 69, 77 e 134 kDa) devido à glicosilação e às isoformas alternativas; valide com controles apropriados em seu sistema de amostra específico.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação antigênica e a diluição do anticorpo podem exigir otimização com base no tipo de tecido e na fixação.
• Como anticorpo monoclonal de coelho, ele pode oferecer alta afinidade e reprodutibilidade para aplicações de ELISA; no entanto, as condições do ensaio devem ser determinadas empiricamente.

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