Anticorpo Policloonal de Coelho EIF2S3 para WB, ELISA - P41091

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da EIF2S3

• A EIF2S3 codifica a subunidade gama do fator de iniciação da tradução eucariótico 2 (eIF2), que é essencial para a iniciação da síntese proteica. O eIF2 forma um complexo ternário com GTP e o RNA iniciador, que se liga à subunidade ribossomal 40S para formar o complexo pré-iniciação 43S (PubMed:31836389). Referências relacionadas: PMID:31836389
• O complexo eIF2 é um heterotrímero composto pelas subunidades alfa, beta e gama; a subunidade gama (EIF2S3) liga-se ao GTP e é responsável pela hidrólise do GTP após a formação do complexo de iniciação 80S, levando à liberação do eIF2-GDP.
• A EIF2S3 está localizada no citoplasma, especificamente no citosol, onde ocorre a iniciação da tradução.
• A proteína é expressa em múltiplos tecidos, incluindo testículo, cérebro, fígado e músculo, o que indica seu papel fundamental na biossíntese de proteínas em diferentes tipos de células.
• A EIF2S3 está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade e interação com outros fatores de iniciação.
• Mutações na EIF2S3 estão associadas a doenças como a síndrome MEHMO (retardo mental, crises epilépticas, hipogonadismo, microcefalia, obesidade), destacando seu papel crítico no desenvolvimento e função neurológica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), considere usar lisados totais de células de linhagens humanas ou de rato, pois o anticorpo tem reatividade cruzada com rato. O peso molecular previsto é de 51 kDa; inclua marcadores de peso molecular adequados e verifique a especificidade da banda.
• Para ELISA, o imunógeno recombinante (aminoácidos 173-472 da EIF2S3 humana) pode servir como controle positivo para avaliar a ligação do anticorpo. Otimize as concentrações de revestimento e as condições de detecção.
• Por se tratar de um anticorpo policloonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes. Valide cada novo lote em seu sistema de ensaio específico e considere usar um tampão de bloqueio contendo leite desnatado ou BSA.
• Para aplicações além de WB e ELISA, recomenda-se a realização de experimentos piloto para determinar a adequabilidade. Observe que o anticorpo foi validado para WB e ELISA; outras aplicações requerem testes adicionais.

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