Anticorpo Policlonal de Coelho eNOS para WB, IF-P, ELISA - P29474

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da eNOS

• Produz óxido nítrico (NO), uma molécula de sinalização chave que induz o relaxamento do músculo liso vascular por meio da transdução de sinal mediada por cGMP, essencial para a regulação da pressão arterial. Referências relacionadas: PMID:1378832
• Medei a angiogênese induzida por VEGF nos vasos coronarianos e promove a coagulação sanguínea por meio da ativação plaquetária.
• Uma variante de splicing natural não possui atividade da eNOS e pode reduzir a regulação da eNOS funcional ao formar heterodímeros inativos.
• Localiza-se principalmente na membrana plasmática e nas caveolas, mas também é encontrada no citoplasma, associada ao citoesqueleto e no aparelho de Golgi.
• É altamente expressa em plaquetas, placenta, fígado e rim, refletindo seus papéis na homeostase vascular e na função plaquetária.
• É regulada por múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, miristoilação e palmitoilação, e requer cofatores como FAD, FMN, heme e zinco para sua atividade.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região C-terminal (aa 1000-1203) da eNOS humana, o que pode permitir a detecção de variantes de comprimento total e truncadas; recomenda-se verificar a especificidade em modelos celulares relevantes que expressem eNOS.
• Para Western blot, é esperada uma banda com migração de aproximadamente 133 kDa. Use marcadores de peso molecular de ampla faixa e otimize a preparação da amostra (por exemplo, usando condições redutoras) para obter resultados claros.
• Em imunofluorescência (amostras embebidas em parafina), protocolos de recuperação de antígeno podem ser necessários; recomenda-se um teste piloto com controles positivos conhecidos (por exemplo, células endoteliais da veia umbilical humana).
• O anticorpo apresenta reação cruzada com a eNOS de camundongo e rato devido à conservação da sequência; valide com lisados de tecido ou células apropriados dessas espécies antes de fazer comparações quantitativas.
• Aplicações em ELISA podem exigir titulações em tabuleiro de damas para determinar as concentrações ideais de antígeno de revestimento e anticorpo; o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção em imunoensaios sanduíche.

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