mAb de coelho F4/80 para IF, IHC-P, ELISA - Q61549

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de F4/80

• F4/80, codificado pelo gene Adgre1 (Emr1), é um receptor acoplado à proteína G (GPCR) de adesão pertencente à subfamília EGF-TM7.
• A proteína de comprimento completo é uma glicoproteína de superfície celular com peso molecular de aproximadamente 102 kDa, contendo vários domínios semelhantes ao EGF e um domínio de sete hélices transmembranares.
• F4/80 funciona como um receptor órfão que se acredita mediar a adesão celular e as interações célula-célula, especialmente no sistema imunológico.
• É expressa especificamente na superfície dos macrófagos, com níveis mais elevados nos macrófagos maduros residentes nos tecidos, mas está ausente nos macrófagos localizados nas áreas de células T dos linfonodos e do baço.
• A expressão em baixos níveis também é detectada em monócitos do sangue, tornando F4/80 um marcador pan-macrofágico bem estabelecido em camundongos.
• O receptor pode contribuir para o desenvolvimento e a função das células T reguladoras (Tregs), conectando a imunidade inata e adaptativa.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de pontes dissulfeto, típicas de proteínas que contêm domínios semelhantes ao EGF e importantes para a estabilidade estrutural.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno consiste em um fragmento recombinante (aa 367–645) da região extracelular de F4/80 de camundongo, visando uma sequência com potencialmente menor interferência de glicosilação; verifique se esse epítopo está exposto nas suas amostras fixadas.
• Para imunofluorescência (IF) em cortes incluídos em parafina (IF-P), considere a recuperação antigênica com tampão citrato (pH 6,0) ou EDTA (pH 9,0) e otimize as condições de incubação do anticorpo primário com base no tipo de tecido.
• Na imuno-histoquímica em cortes de parafina (IHC-P), valide o anticorpo em um controle positivo conhecido para F4/80 (por exemplo, células de Kupffer do fígado de camundongo ou macrófagos da polpa vermelha do baço) e inclua um controle de isotipo para avaliar a coloração de fundo.
• Ao realizar ELISA, use o anticorpo como reagente de captura ou detecção contra a proteína recombinante F4/80 de camundongo e verifique novamente a reatividade com F4/80 de rato se o ensaio for destinado a amostras de rato.
• Como anticorpo monoclonal de coelho, oferece consistência entre lotes; no entanto, confirme a reatividade específica no seu sistema experimental, especialmente ao utilizar modelos knockout ou de knockdown.

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