Anticorpo Monoclonal de Coelho anti-Humano/Macaco CD45 Conjugado com FITC para FC - P08575

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CD45

• O CD45, também conhecido como PTPRC, é uma fosfatase proteica tirosina do tipo receptor que serve como antígeno comum de leucócitos (L-CA ou T200). Atua como um regulador positivo da ativação de células T através do receptor de antígeno ao se ligar ao DPP4, e é necessário para uma coativação eficaz de células T. Referências relacionadas: PMID:35767951
• A região intracelular abriga dois domínios de fosfatase: o primeiro domínio possui atividade enzimática, enquanto o segundo modula a especificidade do substrato. O CD45 desfosforila intermediários de sinalização chave, como SKAP1, FYN e LYN, ajustando finamente os limiares de sinalização do receptor de células T.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas (1–8) com domínios extracelulares variáveis. Em timócitos, as isoformas 1, 2, 3, 5 e 7 são detectadas, enquanto as isoformas 4, 6 e 8 estão ausentes, indicando uma expressão de isoformas estritamente regulada durante o desenvolvimento de células T.
• A localização subcelular inclui a membrana celular, balsas de membrana e a sinapse imunológica, onde o CD45 interage dinamicamente com células apresentadoras de antígenos para modular a ativação de células T e limitar a autoreatividade.
• Como uma proteína fortemente glicosilada e fosforilada, o CD45 exibe uma faixa de peso molecular aparente de 131–147 kDa em SDS-PAGE, refletindo extensas modificações pós-traducionais que influenciam sua função e diversidade de isoformas.
• O CD45 também participa das interações hospedeiro-patógeno: atua como receptor para a proteína UL11 do citomegalovírus humano, levando à proliferação prejudicada de células T após o engajamento viral.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para citometria de fluxo, titule o anticorpo para determinar a concentração ideal para o seu tipo de célula específico e configuração do instrumento.
• Use PBMCs humanos ou suspensões de linfócitos de macaco cinomolgo como controles positivos; o CD45 é altamente expresso em todos os subconjuntos de leucócitos, fornecendo um marcador de "gating" robusto.
• Incorpore este conjugado FITC em painéis multicoloridos junto com marcadores para células T, células B e células mieloides para permitir imunofenotipagem abrangente.
• Certifique-se de que o citômetro esteja equipado com um laser de 488 nm e filtros apropriados para detecção de FITC.
• Valide a coloração com um controle de isotipo apropriado e inclua o bloqueio do receptor Fc para minimizar a ligação inespecífica.
• Observe que o epítopo mapeia para o domínio extracelular (aa 26–577), que é compartilhado entre múltiplas isoformas de CD45, apoiando o reconhecimento amplo de leucócitos.

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